细胞内外环境中凝溶胶蛋白水平对中性粒细胞趋化功能的影响

摘要

第一部分：
　　目的：研究凝溶胶蛋白（Gelsolin，GSN）自身对大鼠离体多形核嗜中性粒细胞（Polymorphonuclear neutrophil，PMN）是否具有趋化作用。
　　方法：成年SD大鼠，麻醉后采集静脉血液标本，采用Ficoll密度梯度离心、葡聚糖沉降、红细胞裂解法分离 PMN。在 Transwell细胞培养系统中进行趋化实验。PMN接种于上室，在下室培养基中加入重组凝溶胶蛋白，观察趋化至下室的PMN数量并计算趋化指数，研究凝溶胶蛋白自身对PMN是否具有趋化功能。
　　结果：在Transwell细胞培养系统下室加入凝溶胶蛋白，趋化至下室的PMN数量和趋化指数均没有明显改变(P＞0.05)。
　　结论：凝溶胶蛋白本身对大鼠离体PMN没有趋化作用。
　　第二部分：
　　目的：研究细胞外环境凝溶胶蛋白水平变化对趋化肽 fMLP（N-formylmethionyl-leucyl-phenylalanine）诱导的PMN趋化功能的影响。
　　方法：成年SD大鼠，麻醉后采集静脉血。采用Ficoll密度梯度离心、葡聚糖沉降、红细胞裂解法分离 PMN。在 Transwell细胞培养系统中进行趋化实验，PMN接种于上室并在上室培养基中加入重组凝溶胶蛋白，下室培养基中加入fMLP，观察趋化至下室的PMN数量并计算趋化指数，研究细胞外凝溶胶蛋白水平改变对fMLP诱导的PMN趋化功能的影响。
　　结果：在Transwell细胞培养系统上室加入凝溶胶蛋白，趋化至下室的PMN数量和趋化指数均没有明显改变(P＞0.05)。
　　结论：细胞外环境中凝溶胶蛋白水平改变，不影响 fMLP诱导的PMN趋化能力。
　　第三部分：
　　目的：研究细胞内凝溶胶蛋白水平变化对趋化肽 fMLP诱导的PMN趋化功能的影响。
　　方法：成年SD大鼠，麻醉后采集静脉血液标本，采用Ficoll密度梯度离心、葡聚糖沉降、红细胞裂解法分离PMN。采用电穿孔法向PMN中分别转入凝溶胶蛋白或其抗体。在Transwell细胞培养系统进行fMLP诱导趋化实验，观察趋化至下室的PMN数量并计算趋化指数，研究细胞内凝溶胶蛋白水平改变对fMLP诱导的PMN趋化功能的影响。
　　结果：向PMN中转入凝溶胶蛋白，趋化至下室的PMN数量和趋化指数均没有明显改变(P＞0.05)；但向PMN中转入凝溶胶蛋白抗体，趋化至下室的PMN数量减少，趋化指数降低(P＜0.05)。
　　结论：向细胞内导入外源性凝溶胶蛋白不影响fMLP诱导的PMN趋化能力，但向细胞内导入凝溶胶蛋白抗体可明显抑制 fMLP诱导的PMN趋化功能。

目录

封面

目录

中文摘要

英文摘要

前言

参考文献

第一部分 凝溶胶蛋白自身对中性粒细胞的趋化功能

1材料与方法

2实验结果

3讨论

参考文献

第二部分 细胞外凝溶胶蛋白水平对中性粒细胞趋化功能的影响

1材料与方法

2实验结果

3讨 论

参考文献

第三部分 细胞内凝溶胶蛋白水平对中性粒细胞趋化功能的影响

1材料与方法

2 实验结果

3 讨 论

参考文献

全文总结

文献综述: 凝溶胶蛋白与炎症反应

致谢

硕士期间的研究成果及发表的学术论文目录