bFGF和NMDA受体在神经病理性疼痛中的相互调控作用

摘要

第一部分 NMDA受体拮抗剂对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角bFGF表达的影响
　　目的：探讨鞘内间断多次给予N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂对坐骨神经分支选择性损伤模型(SNI)大鼠神经病理性疼痛的缓解作用及其可能的机制。
　　方法：72只雄性SD大鼠随机分为6组(n=12)：假手术组(S组)、坐骨神经分支选择性损伤组(NP组)、氯胺酮低剂量组（K1组）、氯胺酮高剂量组(K2组)、MK-801低剂量组(M1组)、MK-801高剂量组（M2组）。S组仅暴露坐骨神经，NP组、K1组、K2组、M1组、M2组制备坐骨神经分支选择性损伤模型。从术后1d开始，K1组、K2组、M1组、M2组通过鞘内置管分别注射氯胺酮50ug、氯胺酮100ug、MK-8015ug和MK-80110ug，容量均为10ul，S组和NP组通过鞘内置管注射0.9％生理盐水10ul，1次/d，连续给药7d。分别于术前1d和术后1-7d，进行疼痛行为学观察和机械刺激缩足反射阈值(PWMT)测定。术后第7d处死大鼠取L4~6节段脊髓，免疫组化测定胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达变化，Western blot检测bFGF蛋白表达变化。
　　结果：与S组比较，NP组PWMT明显降低(P<0.05)，bFGF、GFAP蛋白含量明显升高(P<0.05)；与NP组比较，K1组、K2组、M1组和M2组PWMT出现升高(P<0.05)，bFGF、GFAP蛋白含量明显降低(P<0.05)，并成剂量依赖性。
　　结论：鞘内间断多次给予NMDA受体拮抗剂可缓解SNI引起的大鼠痛觉过敏，其机制可能与抑制bFGF蛋白表达及星形胶质细胞活化有关。
　　第二部分 bFGF对神经病理性疼痛大鼠脊髓NMDA受体表达的影响
　　目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠神经病理性疼痛中的作用及对脊髓N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体亚基表达的影响。
　　方法：48只雄性SD大鼠随机分为假手术组（A组）、假手术+ bFGF抗体组（B组）、SNI组（C组）、SNI+bFGF抗体组（D组），每组12只。制备坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型。其中B组和D组于建模后1d、6d、9d、13d、16d、20d蛛网膜下腔注入稀释至40ul的bFGF抗体18μg。A组和C组则在同一时间注射等体积磷酸盐缓冲液（PBS）。分别于术前1d和术后1d、4d、7d、14d、21d测定机械刺激缩足反射阈值（PWMT）。术后第21d处死大鼠取L4~6节段脊髓，免疫组化测定胶质纤维酸性蛋白（ GFAP）表达， RT-PCR及Western blot检测NMDA受体亚基NR1、NR2A、和NR2B表达变化。
　　结果：与A组和B组比较，C组和D组PWMT降低，脊髓GFAP、NR1和NR2B表达升高（P<0.05）。与C组比较，D组PWMT升高，脊髓GFAP、NR1和NR2B表达降低（P<0.05）。
　　结论：鞘内注射bFGF抗体能缓解SNI大鼠神经病理性疼痛，其机制可能与其调节NR1和NR2B表达有关。

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前言

第一部分 NMDA受体拮抗剂对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角bFGF表达的影响

1 材料与方法

2 结果

第二部分 bFGF对神经病理性疼痛大鼠脊髓NMDA受体表达的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

结论

参考文献

文献综述: bFGF的产生机制及在临床疾病中的研究进展

致谢

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