主动靶向阿霉素脂质体的制备及其体外评价

摘要

当下，乳腺癌是最常发的一种妇科肿瘤，每年因乳腺癌病发而造成死亡的人数位居妇科肿瘤首位。手术治疗是乳腺癌临床治疗的首选方案。放疗和化疗是乳腺癌治疗的辅助手段，然而由于肿瘤放化疗都会产生明显的毒副作用，肿瘤化疗具有较强的全身毒性，因此迫切需要探索新的治疗手段。
　　整合素受体是在肿瘤细胞表面高度表达的一种受体，常见于乳腺癌，胶质瘤以及肝癌和黑色素瘤等肿瘤细胞表面，而在其他正常细胞表面却较少表达，因此整合素受体成为了肿瘤靶向治疗的研究热点。有研究显示 RGD是整合素受体的特异性配体，RGD肽对整合素受体具有高效选择性。八聚精氨酸R8是由8个精氨酸分子呈链状连接成的细胞穿膜肽，它能够高效穿透与之接触的细胞膜，进入细胞内部，不具有选择性。
　　本课题以临床上常用的肿瘤化疗药物阿霉素为模型药物，制备了R8-RGD修饰的阿霉素脂质体。通过共价结合的方式，将 R8-RGD连接于脂质体表面，制备了R8-RGD修饰的载阿霉素脂质体。
　　本文的第一部分为MCF-7细胞的培养及实验分组。将实验室保存的MCF-7细胞经过复苏，传代培养，冻存等步骤进行培养并分组，将MCF-7细胞随机分为PBS组、普通阿霉素脂质体组、RGD修饰的阿霉素脂质体组、R8修饰的阿霉素脂质体组和RGD-R8修饰的阿霉素脂质体组。
　　本文第二部分将制备不同的阿霉素脂质体，对其理化性质进行考察，并在细胞水平对其进行评价。首先是考察 RGD-R8修饰的阿霉素脂质体表征。结果显示，制备得到的 RGD-R8修饰的阿霉素脂质体呈球形，粒径较为均一。由于阿霉素本身具有红色荧光。我们以阿霉素为探针检测了乳腺癌MCF-7细胞对于脂质体的摄取能力，结果显示，乳腺癌MCF-7细胞对RGD-R8修饰的阿霉素脂质体的摄取效率显著强于其他脂质体组，差异有统计学意义（ P<0.01）。我们进一步考察了RGD-R8修饰的阿霉素脂质体被MCF-7细胞摄取的机制。结果显示：MCF-7细胞对RGD-R8修饰的阿霉素脂质体的摄取是一个温度、能量和电荷依赖的由网格蛋白介导的摄取过程。我们将载药后的脂质体进行细胞毒性实验，实验结果表明，在给药量相同的情况下，RGD-R8修饰的阿霉素脂质体对肿瘤细胞的抑制作用显著强于其他脂质体，这与细胞摄取结果相同。
　　综上所述，本研究成功制备了 RGD-R8修饰的阿霉素脂质体，该系统具备一定的乳腺癌细胞靶向性和乳腺癌细胞生长抑制能力，是一种具有潜力的传递抗肿瘤药物治疗乳腺癌的药物传递系统。

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英汉缩略语名词对照

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分 细胞培养及分组

1材料

2方法

3结果

第二部分 RGD-R8-LP-DOX的制备及其表征

1材料

2方法

3结果

4讨论

参考文献

全文总结

文献综述: 靶向脂质体的研究进展

致谢

硕士期间发表的论文