IRF1与IFN-β协同调节M1巨噬细胞极化及其抗肿瘤效应

摘要

目的：初步探讨IRF1与IFN-β协同调节M1巨噬细胞极化的机制及其抗肿瘤效应。
　　方法：用PMA，IFN-γ及LPS将U937单核系肿瘤细胞诱导成经典极化的巨噬细胞（M1），流式细胞术检测M1/M2表面标志物CD86及CD206，荧光定量PCR及ELISA分别检测M1/M2相关细胞因子：IL-12p35、IL-12p40、IL-12p70、IL-23p19、IL-6、TNF-α及IL-10。用中和性单抗及siRNA-IFNB1/siIRF1两种方法将IFN-β中和，或IFNB1或IRF1干扰后，检测內源性IFN-β以及IRF1对M1巨噬细胞极化的影响，同时荧光定量PCR，Western blot及ELISA检测IRF1、IFN-β和 IRF5的表达情况。以条件培养基（ CM）分别培养肝癌细胞系SMCC-7721和 HepG2，用 CCK8检测肝癌细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell实验检测肝癌细胞侵袭。
　　结果：用U937构建的M1巨噬细胞模型高表达M1相关标志物IL-12p35、IL-12p40、IL-12p70、IL-23p19、IL-6、TNF-α和CD86（P＜0.05），低表达M2表面标志物CD206。阻断IRF1或IFN-β的作用后，与对照组相比，M1相关标志物IL-12p35、IL-12p40、IL-12p70、IL-23p19、IL-6、TNF-α和CD86表达降低（P＜0.05），M2表面标志物CD206和IL-10表达升高（P＜0.05）；阻断IRF1后，IFN-β和IRF5表达降低；阻断IFN-β后，IRF1和IRF5表达降低。用阻断IRF1和IFN-β后的条件培养基（CM-siIFNB1或CM-Ab）培养SMCC-7721和HepG2后，与对照组相比，肝癌细胞的增殖能力和侵袭能力增强，细胞凋亡降低（P＜0.05）。
　　结论：在用IFN-γ及LPS诱导而成的U937-M1巨噬细胞模型中，IRF1和IFN-β相互调节，且二者可能共同调节IRF5的表达，进一步促进M1巨噬细胞极化及其抗肿瘤效应。

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前言

第一部分M1型巨噬细胞模型的构建

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第二部分IRF1与IFN-β对M1型巨噬细胞极化的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第三部分IRF1与IFN-β对M1型巨噬细胞抗肿瘤效应的影响

1 材料与方法

2 结果

3讨论

全文总结

参考文献

文献综述: 肿瘤微环境与巨噬细胞极化及巨噬细胞极化机制

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文