熊果酸抑制人结肠癌细胞HCT116增殖与Wnt/β-catenin信号的关系研究

摘要

结肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，发病率和致死率均较高。目前对结肠癌的诊断和治疗水平已有较大提高，但其治疗效果及预后仍不乐观。因此，寻找新的药物靶点或开发新的治疗药物是目前攻克结肠癌所面临的主要任务之一。熊果酸（Ursolic acid, UA）对多种肿瘤细胞有抗肿瘤作用，但具体机制尚不清楚。本课题主要分析熊果酸对结肠癌细胞增殖的影响及可能的分子机制。采用结晶紫染色、流式细胞术、RT-PCR、Western Blot和荧光素酶报告质粒等实验方法，首先检测UA对结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响。然后检测UA对TGF-β3、p-Smad2/3的表达影响，在结肠上皮细胞及不同的结肠癌细胞中TGF-β3的内源性表达情况，并检测了外源性过表达或抑制TGF-β3对UA抑制结肠癌细胞HCT116增殖的影响。最后，分析UA对Wnt/β-cantenin信号的影响，并运用TGF-β3过表达重组腺病毒及TGF-β3抑制剂，分析UA抑制结肠癌细胞HCT116增殖与TGF-β3和Wnt/β-cantenin信号的关系。结果表明，UA能明显抑制HCT116细胞增殖，并能诱导G1期阻滞，同时促进HCT116细胞凋亡。UA降低HCT116细胞中TGF-β3及p-Smad2/3的水平。TGF-β3抑制剂能增强UA对HCT116细胞增殖抑制作用，而外源性过表达TGF-β3能减弱UA对HCT116细胞增殖的抑制作用。进一步分析发现，UA在 HCT116细胞中下调β-catenin水平并抑制Wnt/β-catenin信号。外源性过表达TGF-β3增加β-catenin的水平并部分翻转UA对β-catenin的下调作用， TGF-β3抑制剂则增强UA对β-catenin表达的抑制作用。本研究结果表明，UA对结肠癌细胞具有明显的增殖抑制作用，机制可能与通过下调 TGF-β3而抑制Wnt/β-catenin信号有关。

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前言

参考文献

第一部分熊果酸抑制HCT116细胞增殖的作用研究

1.实验材料和方法

2实验结果

3实验结论

第二部分熊果酸抑制HCT116细胞增殖与Wnt/β-catenin信号的关系研究

1实验材料和方法

2实验结果

3实验小结

讨论

全文总结

参考文献

文献综述: Wnt信号通路及其潜在的治疗作用

致谢

攻读硕士期间在国内外杂志发表文章情况