小分子药物抑制急性T淋巴细胞白血病增殖的机制研究

摘要

目的：
　　急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）是造血系统恶性肿瘤，预后差，复发率高，目前缺乏特异靶向治疗药物。现有文献报道GSK-J4是一种新型小分子化合物，可以通过抑制靶蛋白JMJD3活性调控细胞组蛋白3赖氨酸27甲基化（H3K27Me）水平，但GSK-J4对T-ALL的作用仍不清楚，本文探讨小分子药物GSK-J4对T-ALL的作用与机制。
　　方法：
　　利用CCK-8实验检测4种不同小分子药物（东莨菪碱、藤黄酸、精眯、GSK-J4）对T-ALL Jurkat细胞及正常人胚肾293T细胞生长的影响，利用AnnexinV方法检测GSK-J4对Jurkat细胞凋亡的影响；利用Real-time RT-PCR、Western Blot检测GSK-J4对Jurkat细胞内H3K27Me3及T-ALL相关基因Tal1、GATA3表达的影响；用Tal1慢病毒感染Jurkat细胞，建立稳定的Tal1敲降细胞株（Jurkat-siTal1）和Tal1过表达细胞株（Jurkat-T1），及siRNA阴性对照细胞（Jurkat-mock1）和过表达阴性对照细胞（Jurkat-mock2），利用CCK-8检测Tal1对Jurkat细胞生长的影响。
　　结果：
　　CCK-8结果表明0-7000 nM浓度东莨菪碱有促进Jurkat和293T生长作用；藤黄酸抑制Jurkat及293T细胞生长，其48H IC50分别为150nM，150nM；精眯抑制Jurkat及293T细胞生长，48H IC50分别为10μM、5μM；GSK-J4抑制Jurkat细胞生长，其24H IC50为7μM，对293T细胞生长无显著影响。AnnexinV结果表明GSK-J4在处理细胞24H后，浓度为1.5μM、5μM、10μM时都能促进Jurkat细胞凋亡，且有浓度依赖。Real-time RT-PCR，Western Blot实验表明GSK-J4作用Jurkat细胞12 H后，浓度为1.5μM、5μM、10μM时促进基因组H3K27me3，及抑制Tal1表达；基因敲低与过表达及CCK-8实验均证明Tal1表达促进Jurkat细胞生长。
　　结论：
　　小分子化合物GSK-J4可特异抑制T-ALL肿瘤细胞生长，其机制与促进基因组H3K27me3，抑制转录因子Tal1表达相关。

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英汉缩略语名词对照

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分具有抑制T-ALL生长功能的小分子药物筛选

1 材料与方法

2. 结果

3. 讨论

第二部分GSK-J4抑制转录因子Tal1的表达

1 材料与方法

2. 结 果

3.讨论

第三部分Tal1促进T-ALL细胞生长

1 材料和方法

2. 结果

3.讨论

全文总结

存在的问题

参考文献

文献综述: Tal1调节急性T淋巴细胞白血病发病机制的研究

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文及参加的学术会议