干扰HMGB1表达对膀胱癌细胞株恶性行为及其化疗敏感性的影响

摘要

目的：
　　探讨高迁移率族蛋白1对膀胱癌细胞株的恶性生物学行为的作用以及其对膀胱癌化疗耐药的影响。
　　方法：
　　20例膀胱肿瘤以及相应癌旁组织，免疫组化方法检测癌和癌旁组织 HMGB1表达差异；应用 RNAi处理膀胱癌细胞株 T24和BIU-87并分组；CCK8、流式细胞术、划痕实验和侵袭实验检测HMGB1敲低后对T24细胞增殖、周期、迁移以及侵袭能力的影响；使用共聚焦显微镜和透射电镜观察LC3荧光斑点；Western blot法检测相关蛋白的表达。
　　结果：
　　HMGB1在癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P＜0.05）；CCK8结果提示，相较于Blank组和NC组，HMGB1干扰组细胞增殖受抑制；流式细胞术提示敲低干扰组中 G0/G1期细胞数量增加，且吉西他滨诱导的细胞凋亡增加；划痕测试法和Transwell侵袭试验显示敲低HMGB1后细胞迁移以及侵袭能力减弱；Western blot结果显示敲低HMGB1后E-cadherin蛋白表达上调，N-cadherin、vimentin、MMP-2、MMP-9、cyclinD1、c-Myc、β-catenin蛋白表达下调，同时可进一步增加吉西他滨诱导的caspase3和PARP1的活化。
　　结论：
　　HMGB1可通过促进膀胱癌细胞EMT进而增强其恶性生物学行为，也可通过促进自噬活化而参与化疗耐药的过程，使膀胱癌细胞对药物敏感性降低。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1材料与方法

1.1 材料

1.2实验方法

2结果

2.1 HMGB1在膀胱癌和癌旁组织中的表达差异

2.2运用HMGB1 siRNA干扰膀胱癌细胞株的HMGB1蛋白表达

2.3靶向干扰HMGB1后对T24细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭功

2.4敲低HMGB1对EMT相关蛋白及β-联蛋白表达的影响

2.5 GEM可刺激膀胱癌细胞株产生自噬和凋亡

2.6敲低HMGB1表达增强GEM诱导的细胞凋亡

2.7敲低HMGB1表达增强GEM诱导的细胞自噬

2.8阻滞自噬可增强GEM诱导的细胞凋亡

3 讨论

全文结论

参考文献

文献综述:HMGB1与肿瘤细胞上皮间质转变和侵袭转移的研究进展

致谢

攻读学位期间发表的论文