细胞焦亡在新生儿坏死性小肠结肠炎中的致病作用

摘要

目的：探讨细胞焦亡是否参与新生儿坏死性小肠结肠炎（Necrotizing Enterocolitis，NEC）发病，并分析其可能的作用机制。
　　方法：将100只新生1日龄的S D大鼠按随机数字表法分为2组(n=50)：正常对照组、坏死性小肠结肠炎新生大鼠组(NEC组)。对照组与母鼠同笼，不予处理；而NEC组则采用缺氧、冷刺激及人工喂养的方式建立模型。2组新生鼠于第1、2、3天固定时间点测量体质量，实验过程中观察记录大鼠的一般情况，并统计其死亡率；在第4天断头处死大鼠，采用HE染色观察回盲部肠组织病理学变化同时行双盲法进行病理学评分，并统计NEC发生率；QP CR检测焦亡相关基因NLR P3、IL-1β、IL-18的表达水平；Western blot检测 Caspase-1的表达及激活情况；ELISA检测肠组织匀浆IL-1β、IL-18的蛋白水平。采用SPSS22.0统计软件进行统计学分析，所有计量资料均用?x±s表示，正态方差齐性资料组间比较采用独立样本 t检验，正态方差不齐组间比较采用Mann-whitney检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
　　结果：与正常对照组相比，NEC组大鼠一般情况差，体质量明显降低，肠上皮损伤明显，NEC的发生率及死亡率亦明显高于对照组；在基因水平，NEC组焦亡相关基因NLRP3、IL-1β及IL-18的表达增高（分别为0.33±0.06vs1.11±0.12，0.40±0.15 vs1.25±0.13，1.04±0.16vs2.35±0.17），P均＜0.05；Western-blot结果显示，激活的Caspase-1仅在NEC组中表达，且下游炎症因子IL-1β及IL-18的水平亦高于对照组（分别为74.4±17.5vs300.4±76.5，23.9±19.3vs214.4±28.1），P均＜0.01。
　　结论：1、本实验成功建立了稳定的新生大鼠坏死性小肠结肠炎模型；2、焦亡相关基因及蛋白水平在坏死性小肠结肠炎新生大鼠组明显增高；3、细胞焦亡参与了 NEC的发病，其具体机制可能与焦亡发生后IL-1β、IL-18的水平升高有关。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1材料与方法

1.1主要仪器和设备

1.2主要材料和试剂

1.3实验动物

1.4实验方法

1.5统计学分析

2结果

2.1大鼠的一般情况

2.2大鼠体质量变化情况

2.3肠组织大体形态观察

2.4肠道组织病理学改变

2.5肠组织病理学评分

2.6两组大鼠死亡率与NEC发生率统计

2.7 QPCR检测NLRP3、IL-1β及IL-18基因水平

2.8 Western-Blot检测Caspasee-1 的表达及激活情况

2 .9肠组织IL-1β、IL-18水平

3、讨论

总结

参考文献

文献综述:细胞焦亡的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表论文