数字PCR技术在慢乙肝病人干扰素治疗应答与疗效评估中的初步应用

摘要

准确定量检测肝内cccDNA的方法一直以来是一项技术难题，但是对于实验室研究及临床应用却又是必不可少的。所以，我们发明了一种敏感的方法来定量检测来自患者肝脏活检组织中的cccDNA。我们招募了二十五名HBeAg+慢性乙型肝炎患者，分别在干扰素治疗前和治疗1年后进行肝活检组织检查。利用数字PCR扩增系统来对肝内cccDNA和HBV DNA水平进行绝对定量。根据干扰素治疗1年后患者的HBeAg血清学转换状态将患者分为应答组或无应答组。与治疗前水平相比，干扰素治疗后应答组肝内HBV DNA和HBV cccDNA水平均明显降低，而无应答组无明显变化。治疗前肝内HBV DNA与cccDNA的比值与患者对PEG-IFN治疗的反应显著相关（P=0.000）。此外，HBeAg血清学转换也与干扰素治疗后应答组肝内pgRNA的降低显著相关（P=0.030）。我们的研究结果表明肝内HBV DNA与cccDNA治疗前的比值对于临床上IFN的选择用药以及预测IFN治疗的反应可能具有重要意义。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

第一部分：干扰素治疗的慢乙肝病人临床资料整理与肝穿组织样本收集

引言

1材料和方法

2 结果

第二部分：慢乙肝病人肝穿组织样本数字PCR的方法学建立

引言

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第三部分：数字PCR技术对HBeAg(+)病人干扰素治疗应答的相关性评估

引言

1材料和方法

2 结果

3 讨论

第四部分：cccDNA复制活性与干扰素治疗应答的预判与疗效的评估

引言

1材料与方法

2 结果

3 讨论

全文总结

参考文献

文献综述:干扰素抗病毒治疗的机理及临床应用

致谢

攻读学位期间发表的学术论文