LPS诱导的孤独症谱系障碍大鼠模型与经典模型的比较

摘要

目的： 构建脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的孤独症大鼠模型，并与经典的丙戊酸钠(valproic acid,VPA)诱导模型进行比较，为孤独症研究中动物模型的选择提供实验依据。 方法： 采用孕中期腹腔注射VPA（G12.5）或LPS（G9.5）的方法分别构建VPA或LPS诱导的子代孤独症大鼠模型（n=28），同时在孕中期相应的时间点分别注射等量的PBS为对照组；监测各组孕鼠生育率、仔鼠死亡率及仔鼠尾部畸形率。同时监测子代生后1-35天（PND1-35）的体重及尾长的动态变化，观察各组仔鼠PND14-17的睁眼时间；行为学检测PND21-35子代大鼠孤独症样行为及空间学习记忆能力。ELISA检测各组子代大鼠（6周龄）血清炎性细胞因子IL-6、IL-1?、IFN-?及TNF-?的水平；Western blotting检测各组子代大鼠前额叶皮质PTEN、p-AKT及p-mTOR蛋白表达水平；高效液相色谱法检测各组子代大鼠前额叶皮质中5-HT的含量。 结果： （1）VPA模型组孕鼠生育率为33.3%，较其对照组（85.7%）有降低趋势，但无统计学差异；仔鼠死亡率（17.07%）明显升高（*P＜0.05），仔鼠尾部弯折畸形率高达87.8%，均明显高于对照组（***P＜0.001）。而LPS模型组的孕鼠生育率（100%）、仔鼠死亡率（1.75%）及尾部畸形率（0%）与其对照组相比并无明显差异。（2）在PND2-PND35，VPA模型组仔鼠与其对照组相比，体重显著降低，尾长明显变短（*P＜0.05）；而LPS模型组仔鼠较其对照组体重明显升高，且尾长显著增长（*P＜0.05）。（3）VPA处理组仔鼠睁眼时间较晚于VPA未处理组，但无统计学意义（P=0.072）；而LPS诱导组仔鼠睁眼时间明显晚于LPS未诱导组，组间差异具有统计学意义（**P＜0.01）。（4）与对照组相比，VPA或LPS处理的子代大鼠在陌生鼠箱中的时间显著减少，在玩具箱的时间明显延长；同时嗅同伴尿液的时间显著降低，嗅啤酒的时间明显升高。另外旷场实验检测结果显示， VPA及LPS处理的子代大鼠跨线数显著降低，自梳理时间显著增加， VPA(+)组在中间区的时间明显降低(*P＜0.05)，但LPS(+)组在中间区的时间与其对照组无统计学差异。水迷宫实验中VPA(+)及LPS(+)两组子代大鼠潜伏期均较对照组显著增加(*P＜0.05；**P＜0.01)。（5）VPA处理组子代大鼠血清IL-1β、IFN-γ及TNF-α浓度显著升高(*P＜0.05)，但IL-6水平与其对照组无显著差异。而LPS处理组子代大鼠血清IL-6、IL-1β、IFN-γ及TNF-α浓度均明显升高(*P＜0.05)。（6）VPA处理组子代大鼠前额叶皮质PTEN蛋白表达水平显著下调(**P＜0.01)， p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平明显增加(*P＜0.05)。但LPS处理组子代大鼠前额叶皮质PTEN和p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平变化却与VPA处理组结果相反(***P＜0.001，***P＜0.001；**P＜0.01)。（7）VPA处理组子代大鼠前额叶皮质5-HT浓度较未处理组显著降低(*P＜0.05)，而LPS处理组却明显升高(*P＜0.05)。 结论： LPS诱导的孤独症大鼠模型与经典VPA模型均能诱导大鼠发育迟缓，产生孤独症样行为，但VPA诱导ASD模型可同时伴发焦虑样行为，且诱导机制存在差异，在科学研究中需要根据研究目的做出适当选择。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

参考文献

1 材料与方法

1.1实验动物

1.2 实验主要试剂及设备

1.3 方法

1.4 统计学分析

2 结果

2.1孕鼠流产率、仔鼠死亡率及尾部畸形率

2.2 体重发育

2.3 尾长发育

2.4 睁眼时间

2.5 三箱实验

2.6 嗅觉适应/去适应实验

2.7 旷场实验

2.8 水迷宫实验

2.9仔鼠血浆IL-6，IL-1β，IFN-γ及TNF-α 浓度变化

2.10 仔鼠前额叶皮质PTEN，p-AKT及p-mTOR蛋白表达水平变化

2.11 仔鼠前额叶皮质5-HT浓度检测

3 讨论

参考文献

全文总结

文献综述:五羟色胺与孤独症

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文及参加的学术交流