司帕沙星介导声动力治疗对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的损伤作用及其机制研究

摘要

目的： 声动力疗法是一种基于低强度超声活化声敏性物质选择性地协同发挥靶向治疗增生性疾病的新兴方法。在类风湿关节炎的病理生理过程中，成纤维样滑膜细胞起着至关重要的作用。司帕沙星是一种临床常用的抗菌药物，具有一定的声敏特性，且可在关节组织蓄积分布。本研究旨在探讨司帕沙星介导声动力治疗对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的损伤作用，并探讨其可能的作用机制。 方法： 体外培养人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A，经司帕沙星处理后，采用超声辐照。分别利用MTT法、流式细胞检测法以及倒置荧光显微观察法检测声动力疗法诱导MH7A细胞活性以及细胞凋亡变化。利用细胞内活性氧探针DCFH-DA标记，通过倒置荧光显微镜和多功能荧光酶标仪分别定性和定量地检测声动力疗法诱导细胞内活性氧物质的产生情况。利用MTT法和流式细胞仪检测活性氧物质阻断剂对声动力疗法诱导MH7A细胞损伤的保护作用。利用Rho123荧光探针，通过倒置荧光显微镜和流式细胞仪分别定性和定量地检测声动力疗法诱导细胞线粒体膜电位改变。 结果： 司帕沙星介导的声动力疗法显著地诱导MH7A细胞活性降低、细胞凋亡增加、活性氧物质产生以及线粒体膜电位降低。活性氧物质阻断剂L-histidine有效地阻断司帕沙星介导的声动力疗法诱导MH7A细胞活性降低、细胞凋亡增加以及细胞线粒体膜电位降低；然而活性氧物质的阻断剂D-mannitol只有轻微的阻断作用。 结论： 司帕沙星介导声动力治疗显著地诱导MH7A细胞毒性损伤，且以诱导细胞凋亡为其主要的细胞毒性效应形式。其机制可能为声动力疗法诱导MH7A细胞内产生过量的活性氧物质（主要为单线态氧），随后过量产生的活性氧物质诱发细胞线粒体功能紊乱，启动细胞凋亡通路，最终导致细胞损伤。

目录

英汉缩略语名词对照

前言

参考文献

第一部分 司帕沙星介导声动力治疗对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的损伤作用研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

5小结

参考文献

第二部分 司帕沙星介导声动力治疗对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的损伤机制研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

5小结

参考文献

全文总结

文献综述:类风湿关节炎的光动力疗法研究进展

致谢

攻读硕士期间发表的论文及参研的基金情况