益气化瘀化痰法对大鼠肺组织结构纤维化病理形态及转录因子Snail1、E-钙粘素及纤连蛋白表达的影响

摘要

研究背景： 肺纤维化是以肺组织成纤维细胞增殖及大量细胞外基质聚集并伴炎症损伤[1]、组织结构破坏为特征的一大类肺疾病的终末期改变，即正常的肺泡组织受损后经过异常修复导致的结构异常（疤痕形成），最终使得器官衰竭的严重危害人类健康的疾病。肺纤维化目前尚缺乏有效防治手段，因此寻找防治肺纤维化的有效治疗方法与药物，一直是国内外研究的热点。现代医学对纤维化的治疗，尤其是对慢性疾病患者器官纤维化的治疗主要还在理论和实验研究阶段，虽然提出了许多治疗纤维化的策略，但还没有药物被证明确实有效。临床上中医药治疗肺纤维化有明显疗效，但治法尚未明确。因此探究益气化瘀化痰法治疗肺纤维化的作用和可能机制具有较大意义。 目的： 探讨益气化瘀化痰法对由博来霉素诱导的大鼠肺组织结构纤维化病理形态的作用及其对转录因子 Snail1、E-钙粘素和纤连蛋白表达的影响。探究益气化痰化瘀法治疗大鼠肺纤维化的机制和作用。 方法： （1）建立大鼠肺纤维化模型：使用一次性气管内注射盐酸博来霉素5mg/kg制备大鼠肺纤维化模型。将70只SPF级SD大鼠随机分成正常对照组（N组）、模型对照组（M组）、阳性对照组(Y组)、益气组（YQ组）、化痰组（HT组）、化瘀组（HY组）和益气化瘀化痰组（YHH组）。 （2）灌胃治疗肺纤维化大鼠：N组和 M组使用生理盐水灌胃，各中药治疗组在造模4周后分别给予益气法制剂、化瘀法制剂、化痰法制剂和益气化瘀化痰法制剂（29.87g/kg/d）灌胃，Y组给予醋酸氢化可的松（25mg/kg/d）灌胃。 （3）在造模和灌胃医治前后，观察实验大鼠的体征、精神、运动状态等一般情况。 （4）处死大鼠取材并做相关实验：12周后处死各组大鼠，Masson染色显微镜下观察肺组织切片的形态变化；Wb法检测各组大鼠肺组织Snail1、E-cad、FN蛋白表达；qRT-PCR检测细胞中Snail1、E-cad、FN mRNA的表达。 结果： （1）各组大鼠在造模后的一般情况与N组大鼠相比差，经中药和激素治疗后的各组大鼠的一般情况均有好转，以YHH组和YQ组最明显； （2）与M组对照，各治疗组肺细胞间质的胶原沉积减少，肺纤维化水平减轻，以YHH组和YQ组最明显； （3）与M组对照，各治疗组中大鼠肺组织Snail1、FN蛋白表达均明显减少（P﹤0.05），尤以YHH组和YQ组减少最显著（P﹤0.01），qRT-PCR结果与Wb结果一致。 结论： 益气化瘀化痰法能改善BLM导致的大鼠肺纤维的程度，其机理与抑制转录因子Snail1的表达有关。

目录

声明

英汉縮略语名词对照

前言

1材料与方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

1.3 统计学处理

2 实验结果

2.1 观察大鼠的肺组织病理结构的肺纤维化的程度

2.2 各组大鼠肺组织Snail1、FN和E-cad 的蛋白表达的比较

2.3 各组大鼠肺组织Snail1、FN和E-cad 的转录RNA表达的比较

3 讨论

参考文献

文献综述1:肺纤维化的中医研究进展

文献综述2:博来霉素诱导的肺纤维化模型的研究进展

致谢