基于错配堆积的无酶循环回路的比色生物传感器检测microRNA

摘要

利用耦合自发的级联催化茎环自组装回路和错配的茎环，建立起一种用于高特异、高灵敏地检测 microRNA的比色生物传感策略。该策略由两层催化茎环自组装反应构成。当靶物质 microRNA存在于检测体系中时，microRNA可引起茎环立足点的置换反应，进而形成第一层催化茎环自组装反应，该反应可以产生中间产物，同时释放出靶物质microRNA。接着，中间产物能作为触发器，触发第二层催化茎环自组装反应，该反应可同时循环释放出中间产物，循环催化第二层反应。最后，第二层催化茎环自组装反应产生的最终产物包含有游离的富 G序列，它能与氯化血红素结合形成G-四链体-氯化血红素DNA酶，它具有辣根过氧化物酶类似的催化活性，能够催化底物，产生肉眼颜色变化或者比色信号。通过对实验条件的优化，在最佳实验条件下，该生物传感器可实现对靶物质在线性范围100 fM到10 nM的检测，其检测限为36.2 fM，同时也能较高选择性地区分出错配的microRNA。另外，该传感器被用于检测硅鱼精样本中的microRNA，同样展示出了较好的分析性能。因此，该生物传感策略在将来或许能为生物医学研究中microRNA的检测提供选择。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

1引言

2实验部分

2.1试剂

2.2仪器

2.3探针的准备

2.4信号检测

2.5凝胶电泳

3结果和讨论

3.1生物传感策略原理

3.2可行性验证

3.3实验条件优化

3.4生物传感器的性能分析

3.5特异性，重复性

3.6复杂样本分析

4总结

参考文献

文献综述:DNA酶放大技术在检测核酸和蛋白质中的应用

致谢

硕士期间发表的论文