构建G4-DNAzyme比色生物传感器检测肿瘤标志物miRNA-21的研究

摘要

miRNA-21在大部分肿瘤中都存在高表达,其含量的异常可作为肿瘤发生的早期诊断标志.基于G-四链体-hemin DNAzyme能催化H2O2氧化2,2'-联氨双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)生成ABTS+,利用链的竞争作用构建了G4-DNAzyme比色生物传感器,该传感器检测miRNA-21时具有操作简单、响应快速的特点.在优化核酸序列设计、反应温度、反应时间等实验条件的基础上,利用紫外分光光度计测量ABTS+的最大吸光度,并计算其与空白样品的信背比(SBR),在不同浓度的miRNA-21下,绘制浓度-SBR曲线.结果显示:实验可检测miRNA-21的最低浓度约为0.1μmol/L;在miRNA-21浓度为0.1～1.2μmol/L时,SBR与miRNA-21的浓度呈现出良好的线性关系,其线性方程为:y=0.8349x+0.8983,相关系数R2=0.995.该G4-DNAzyme比色生物传感器设计简单,操作方便,无需高精密仪器,对目标物有良好响应性及高选择性.