前扣带皮层中GluR1受体磷酸化在瑞芬太尼诱发的痛觉过敏和焦虑中的作用和机制

摘要

目的： 在围术期给予瑞芬太尼术中镇痛术后部分患者可诱发痛觉过敏现象（Remifentanil Induced Hyperalgesia RIH）。前扣带回皮层（Anterior Cingulate Cortex ACC）在疼痛，情感和记忆中的作用至关重要。扣带回皮质中的GluR1受体的磷酸化对于ACC中的神经元激活也是必不可少的。关于RIH发生机制的研究现大多都在脊髓水平而脊髓上中枢神经在其中的作用研究较少，特别是ACC和瑞芬太尼之间潜在的相互作用诱发痛觉过敏的机制还有待阐明。 方法： 在SD大鼠前扣带回皮质局部注射鹅膏蕈氨酸（Ibotenic acid IBO）、蛋白激酶A（PKA）抑制剂H89或二甲基亚砜（Dimethyl Sulfoxide DMSO）干预扣带回皮质神经元活性，待大鼠恢复后尾静脉泵注瑞芬太尼或生理盐水60分钟建立RIH模型和对照模型。通过缩足机械阈痛阈值（Paw Withdrawal Mechanical Threshold PWT）和缩足热痛阈值（Paw Withdrawal Latency PWL）测定大鼠痛觉阈值改变情况，观察RIH的发生。通过旷场实验（Open Field Test OFT）和高架十字迷宫实验（Elevated Plus Maze EPM）观察大鼠行为评估OIH发生时焦虑状况的改变。Western blotting检测AMPA受体亚单位的表达及其磷酸化水平（GluR1，GluR1ser845）的磷酸化水平改变，免疫荧光染色检测ACC中C-fos和Arc的表达情况观察ACC中神经元激活与OIH的关系。所有测试以及检测时间点定在瑞芬太尼输注后0h,2h,6h,24h。 结果： 在行为测试中，RIH的发生程度与焦虑状态改变呈正相关，当SD大鼠痛觉阈值降低最为明显时，焦虑状况也最为严重。使用H89（PKA的抑制剂）可以减轻RIH发生时痛阈值降低，缓解焦虑状况。蛋白质印迹显示疼痛阈值降低最明显时，ACC中GluR1ser845的磷酸化表达显著增加。使用H89（PKA抑制剂）可以抑制GluR1ser845的磷酸化的表达。免疫荧光染色结果显示当疼痛阈值降低最为明显时，扣带回皮质中C-fos表达量显著高于空白对照组，Arc的表达量低于空白对照组。使用H89局部注射后（PKA抑制剂）可以降低ACC中C-fos的表达并且增加Arc的表达量。当局部注射鹅膏蕈氨酸造成ACC损伤后瑞芬太尼不能诱导痛觉过敏的发生以及焦虑情绪的出现。 结论： ACC在RIH中是痛觉阈值改变以及相关焦虑状况改变的的关键枢纽，抑制ACC中GluR1ser845的磷酸化可调节RIH诱发的痛觉阈值下降和焦虑情况改变。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

第一部分ACC损毁模型、OIH模型的建立以及相关痛阈焦虑行为改变的测定

前言

1材料和方法

2结果

3讨论

第二部分OIH发生过程中GluR1受体磷酸化改变以及ACC中相关神经元激活状态

前言

1材料和方法

2结果

3讨论

参考文献

综述:焦虑在阿片药物致痛觉敏感机制研究进展综述

致谢

攻读硕士期间发表的论文