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【6h】

miR-1a-3p改善异丙肾上腺素诱导的心力衰竭及其机制研究

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目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1 材料

1.1实验动物

1.2实验试剂

1.3实验仪器

1.4实验试剂配制方案

2 方法

2.1 小鼠心力衰竭的建立

2.2 给药方法

2.3 小鼠摄食统计

2.4 小鼠体重统计

2.5 超声心动图检测心功能

2.6 病理分析

2.6.1 血清样品采集

2.6.2 心脏大体观、心脏重量与体重比及肺脏重量与体重比

2.6.3 石蜡包埋

2.6.4 石蜡切片制备

2.6.5 HE染色

2.6.6 天狼星红染色

2.6.7 过碘酸雪夫氏(PAS)染色

2.6.8 免疫组织化学染色

2.6.9 免疫荧光染色

2.6.10 WGA染色

2.6.11 TUNEL细胞凋亡染色

2.7 Western blotting分析蛋白表达水平

2.7.1 提取总蛋白

2.7.2 检测蛋白浓度

2.7.3 SDS-PAGE电泳

2.7.4 转膜

2.7.5 封闭及免疫反应

2.7.6 显示及半定量分析

2.8 荧光定量PCR(qPCR)

2.8.1 提取心脏组织总RNA

2.8.2 逆转录反应

2.8.3 荧光定量PCR

2.9 血清酶联免疫反应(ELISA)

2.10 统计方法

3 结果

3.1腹腔注射异丙肾上腺素可以成功建立小鼠心力衰竭模型

3.2 衰竭的心脏组织中Dicer、miR-1a-3p和miR-133a-3p表达水平下降,并且miR-195a-5p、miR-208a-3p和miR-499-5p的表达水平升高

3.4 尾静脉补偿性注射agomiR-1可恢复心脏中miR-1a-3p的表达

3.5 补充miR-1a-3p可改善ISO诱导的心功能不全

3.6 输注miR-1a-3p可改善ISO治疗诱导的心室重构

3.7 补偿性输注miR-1a-3p减轻细胞增殖

3.8 MiR-1a-3p调节线粒体ND1和COX1的表达

3.9 MiR-1a-3p调节线粒体钙单向转运蛋白(MCU)的表达

4 讨论

全文总结

参考文献

文献综述:miRNAs与心力衰竭

致谢

攻读学位期间发表的论文情况

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著录项

  • 作者

    何芮;

  • 作者单位

    重庆医科大学;

  • 授予单位 重庆医科大学;
  • 学科 临床医学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 苏立;
  • 年度 2019
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类
  • 关键词

    异丙肾上腺素; 诱导; 心力衰竭;

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