声明
英汉缩略语名词对照
前言
第一章 通过RNA-seq数据筛选差异表达的circRNA和mRNA
1材料
1.1 临床样本
1.2 细胞
1.3 主要试剂及耗材
2方法
2.1细胞培养
2.2 RNA-seq分析
2.3 实时荧光定量PCR
2.3 原位杂交
2.4 统计分析
3 结果
3.1 TNBC中的circRNA和mRNA差异表达谱
3.2 circAGFG1和CCNE1在TNBC中的表达上调
3.3 circAGFG1和CCNE1的表达量与TNBC患者的预后呈负相关
第二章 circAGFG1在体内外对三阴乳腺癌细胞生物学特性的影响
1材料
1.1 细胞
1.2 主要试剂及耗材
2方法
2.1 细胞培养
2.2 细胞转染
2.3 实时荧光定量PCR
2.4 CCK-8实验
2.5 EdU实验
2.6 克隆形成实验
2.7 划痕实验
2.8 Transwell实验
2.9 TUNEL实验
2.10 Hoechst 33342实验
2.11 流式细胞术
2.12 Western blot
2.14 裸鼠移植瘤实验
2.15免疫组化实验
2.16统计分析
3 结果
3.1 circAGFG1过表达及干扰质粒效率验证
3.2 过表达或敲低circAGFG1对细胞增殖能力的影响
3.3 过表达或敲低circAGFG1对细胞迁移及侵袭能力的影响
3.4敲低circAGFG1对细胞周期和凋亡的影响
3.5 circAGFG1促进体内肿瘤发生及转移
3.6 circAGFG1在体内调节CCNE1及细胞周期相关蛋白的表达
第三章 circAGFG1在TNBC中作为miR-195-5p的ceRNA的机制研究
1材料
1.1 细胞
1.2 主要试剂及耗材
2 方法
2.1 细胞培养
2.2 FISH
2.3 qRT-PCR
2.4 双荧光素酶报告基因实验
2.5 RIP实验
2.6 Pull-down实验
2.7western blot
2.8 EdU实验
2.9 Transwell实验
2.10 免疫荧光实验
2.11 统计分析
3 结果
3.1 生物信息学预测
3.2 miR-195-5p在TNBC组织中低表达
3.3 circAGFG1与miR-195-5p共定位于细胞质
3.4 miR-195-5p能够靶向结合circAGFG1
3.5 miR-195-5p能够靶向结合CCNE1
3.6 circAGFG1通过miR-195-5p调节CCNE1的表达进而促进TNBC细胞增殖和侵袭
讨论
参考文献
文献综述:circRNA的生物发生及其在乳腺癌中的作用
致谢
硕士期间发表的论文
