三氧化二砷和胂酸基乙酸对人肝癌细胞凋亡作用的研究

摘要

目的:观察As<,2>O<,3>和ASAC体外对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响并探讨其作用机制.方法:1、MTT法观察As<,2>O<,3>和ASAC对SMMC-7721生长的影响,;同时确定ASAC实验用药的最佳浓度;2、倒置显微镜观察实验组和对照组细胞形态学改变,及透射电镜检测凋亡小体;3、PI染色流式细胞仪细胞仪检测实验组和对照组细胞凋亡峰和细胞周期的改变;4、凝胶电泳观察凋亡细胞DNA的

目录

文摘

英文文摘

1绪论

1.1引言

1.2砷毒与砷化物抗肿瘤的发现

1.3砷化物治疗肿瘤研究的进展

1.4砷化物的生物学机制

1.4.1砷化物的体内转运与代谢机制

1.4.2砷的致癌作用机制

1.4.3砷的抑癌作用机制

1.5细胞凋亡与肿瘤药物筛选

1.6细胞凋亡的研究手段

1.7本次实验研究对象及任务

2改良MTT法检测药物作用细胞的最佳浓度

2.1实验原理

2.2实验过程

2.2.1实验仪器

2.2.2主要实验药品

2.2.3人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的复苏与传代培养

2.2.4细胞活度检测：MTT实验(噻唑盐比色实验)

2.2.5实验结果

2.2.6讨论

3细胞凋亡的形态学观察

3.1细胞凋亡的形态学表现

3.2电子显微镜观察

3.2.1透射电镜的成像原理

3.2.2实验器材与试剂配制

3.2.3实验步骤

3.2.4实验结果

3.2.5讨论

4流式细胞仪检测细胞凋亡

4.1用于流式细胞仪检测的荧光染料

4.2流式细胞仪检测细胞凋亡的原理

4.2.1核的改变

4.2.2细胞膜的改变

4.2.3光散射特性

4.3实验过程

4.3.1实验药品与器材

4.3.2凋亡细胞的获得

4.4实验结果与讨论

4.4.1亚二倍峰(Sub-G1峰，即AP峰-apoptotic peak)的测定

4.4.2对细胞周期的影响

5核酸DNA梯度电泳检测细胞凋亡

5.1实验过程

5.1.1实验仪器

5.1.2实验药品

5.1.3细胞凋亡DNA提取及鉴定

5.2实验结果与讨论

6全文总结与后续工作建议

6.1主要研究内容及结论

6.2后续工作建议

致射

参考文献