迭鞘石斛抗肿瘤作用研究

摘要

石斛是常用名贵中药材，为兰科石斛属多种植物的新鲜或干燥茎的统称。现代医学研究表明石斛具有多种功效：防治白内障作用、对胃肠道的作用、滋阴清热和生津作用、抗肿瘤活性、免疫调节作用、对糖尿病的治疗作用等。 本实验研究迭鞘石斛三种提取物的抗肿瘤作用。体外细胞实验考察药物对人肝癌细胞的生长抑制作用以及对人正常肝脏细胞的毒害作用。体内动物实验考察药物对移植性肿瘤S180的抑制作用，以及药物对机体免疫功能、抗氧化功能、肿瘤细胞凋亡的影响。 采用不同方法获得了迭鞘石斛水提、醇提和多糖类物质。对多糖进行初步纯化，并检测其蛋白质含量，测定粗多糖总糖含量及该多糖分子量，正交设计优化多糖提取工艺。实验结果，迭鞘石斛多糖的重均分子量为128912，数均分子量为11189。摩尔质量分散系数为11.52，表明它的摩尔质量分布并不均一。粗多糖中蛋白质含量为0.111％，总糖含量为30.4％。其最佳提取工艺为300ml水，回流3次，每次1.5小时。 体外培养人肝癌细胞SMMC-7721和人正常肝脏细胞HL－7702，观察药物的抑制作用。结果提示，160μg/ml迭鞘石斛多糖作用48h时能显著抑制SMMC-7721的生长，且相同条件下对HL－7702的影响较小。表明迭鞘石斛多糖可能是一种毒副作用较小的抗肿瘤药物。 以S180肉瘤模型小鼠为研究对象，腹腔注射给药，连续10天，次日处死。解剖出小鼠肿瘤、脾脏、胸腺，称重；取眼眶血，测血清中总SOD和MDA的含量；肿瘤固定、切片，常规HE染色。结果表明：处死前各组小鼠体重差异明显，迭鞘石斛各提取物组体重均大于阳性对照和阴性对照组，表明迭鞘石斛对小鼠的生长有一定的促进作用。多糖的高、中、低三个浓度组抑瘤效果均较好，取0.625mg/ml为其体内最佳抑瘤浓度。多糖组小鼠的免疫指数有极显著上升，表明迭鞘石斛多糖能保护并促进荷瘤小鼠免疫功能恢复。迭鞘石斛各提取物组小鼠血清中的总SOD含量均有所上升，多糖组小鼠血清中的MDA含量均有降低，其中高浓度组与阴性对照相比有极显著差异，表明迭鞘石斛多糖能增强机体抗氧化功能。光镜下观察荷瘤小鼠肿瘤切片发现，多糖处理组的肿瘤细胞有明显的细胞凋亡的特征。 本实验结果表明多糖类成分正是迭鞘石斛中具有免疫增强作用和抗肿瘤作用的主要活性成分。它调动机体自身的免疫功能和抗氧化功能来抵抗肿瘤，达到扶正驱邪，提高机体抗癌能力的功效。迭鞘石斛多糖还能一定程度的诱导肿瘤细胞凋亡，是一种值得深入开发的抗肿瘤天然药物。