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白腐菌酶对木质素的降解以及三苯甲烷类染料降解菌的筛选与降解条件的优化

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1 绪 论

1.1 白腐菌

1.2 木质素

1.3 三苯甲烷类染料废水的降解

1.4研究目的和内容

1.5创新之处

2 Mnp和Lac酶对木质素的降解

2.1 前言

2.2 材料与方法

2.3 分析方法

2.4 结果与分析

2.5 本章小结

3 三苯甲烷类染料降解菌的筛选及鉴定

3.1 引言

3.2降解菌株的筛选

3.3 结果与讨论

3.4降解菌的形态鉴定

3.5 菌株分子生物学鉴定

3.6 小结

4 结晶紫降解条件的优化

4.1 引言

4.2 材料与方法

4.3 实验结果与分析

4.4 本章小结

5 讨论与展望

5.1 讨论

5.2 后续工作建议

致谢

参考文献

附 录

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摘要

通过构建白腐菌降解木质素的主要酶系-锰过氧化物酶(Mnp)、漆酶(Lac),考察了底物浓度、酶活对降解效果的作用,结果表明:1.底物浓度对木质素去除率的影响为,Mnp体系中,碱木素浓度为40 mg/L时去除率最大,为29.41%,Lac体系中,碱木素的浓度为100 mg/L时去除率最大,为62.67%;2.不同酶活条件下对木质素去除率的影响为,Mnp体系中,木质素的去除率随着Mnp酶活的增大而增加,酶活为3.6 U/mL时去除率达到18.40%,显著高于其他Mnp降解体系,Lac体系中,木质素的去除率随着Lac酶活性的增大而增加,酶活为3.6 U/mL时去除率达到38.11%,Lac酶活的高低对碱木素的去除率有显著性的影响。对降解产物进行GC-MS测定,结果表明碱木素降解后的产物主要为一些有机酸类物质、脂类物质和芳香族类的物质等,表明Mnp与 Lac对碱木质素进行了有效的降解。
  基于白腐菌能够有效地降解含苯环结构的复杂物质(木质素),为了扩大白腐菌的应用范围,考察其对含苯环结构的三苯甲烷类染料的降解作用,以结晶紫作为三苯甲烷类染料代表,经过菌种的筛选和鉴定,得到了两株降解效果较好的新菌种:1.菌种F3,用形态学方法和ITS法鉴定该菌种为黑曲霉(aspergillus niger);2.菌种H4,鉴定为毛栓菌(Trametes hirsuta)。
  比较两种菌种单独降解和混合降解染料的效果,F3和H4的混合培养降解结晶紫的效果更好,培养72h后降解去除率达到99.41%。同时对培养条件进行了优化,结果表明:在转速为160rpm、底物浓度为5mg/L、温度为30℃、pH=5时对结晶紫的去除率最高。

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