肥大细胞与骨髓细胞对小鼠急性心肌梗死后心功能保护作用的比较研究

摘要

[背景] 细胞移植是治疗急性心肌梗死的一种新方法。采用不同类型细胞进行的动物实验和临床研究，如骨髓来源的细胞系、骨骼肌母细胞和胚胎干细胞，均证明细胞移植能改善心肌梗死后心功能。但其机制尚不清楚。目前公认的细胞移植改善心功能的主要机制可能有：移植细胞的潜在的分化为血管和心肌样细胞的能力；刺激血管新生；抑制凋亡及激活内源性修复机制。越来越多的证据表明，各种各样的细胞因子和生长因子可能通过自分泌或旁分泌的方式，参与上述机制中。 急性心肌梗死的修复与急性炎症反应有关，涉及了不同细胞类型之间动态相互作用，最终导致了肉芽组织取代了受损伤的心肌细胞。众所周知，肥大细胞参与了肉芽组织的形成。肥大细胞是重要的多功能的分泌细胞，来源于骨髓CD34<'+>的造血干细胞，是无分化能力，但具有产生多种蛋白质水解酶、各种各样细胞因子和生长因子的分化成熟的细胞。肥大细胞很有可能通过激活细胞因子瀑布而启动了炎症反应和组织修复作用，从而在了心肌梗死的修复过程中起到了重要的作用。而骨髓干细胞移植可改善心肌梗死后心功能，这一点已得到很多实验的证实。在本实验中，我们假设：肥大细胞移植可通过参与炎症反应及后续的损伤修复过程改善心肌梗死后心功能。为了验证我们的假设，通过将骨髓来源的肥大细胞、新鲜分离的骨髓细胞和无血清的培养液移植入小鼠急性心肌梗死模型中梗死处心肌内。我们观察细胞移植后对心功能的影响，并进一步探讨其可能机制。 [方法] 1．小鼠骨髓来源的肥大细胞的培养、鉴定，小鼠新鲜骨髓细胞的获得； 2．小鼠急性心肌梗死模型的建立及培养液、肥大细胞和骨髓细胞移植； 3．利用经胸小鼠超声心动术及压力．容积导管分析检测小鼠心脏功能； 4．心肌梗死面积的测定； 5．利用流式细胞技术检测心肌梗死后炎症细胞浸润； 6．利用免疫染色测定肌纤维母细胞的增殖； 7．利用免疫染色测定血管形成； 8．利用ELISA方法检测小鼠心肌梗死后心脏梗死区和非梗死区释放的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)； 9．利用免疫组织化学染色检测心肌梗死后细胞凋亡； 10．移植细胞存活的检测。 [结论] 1．与骨髓细胞比较，在小鼠心肌梗死后肥大细胞只能短暂地改善心功能。 2．肥大细胞移植引起的短暂改善小鼠心功能和减小心肌梗死面积作用是与组织损伤修复过程有关，包括了炎症反应、细胞因子释放、促进血管新生、肌纤维母细胞增殖及减少细胞凋亡。 3．骨髓细胞移植的长期改善小鼠心功能作用是由于骨髓细胞的长期存活和血管新生的细胞因子持续释放。

目录

缩略词表

摘要

前 言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

参考文献

附 图

综述 肥大细胞与缺血性心脏病的相关性

致谢