比较正常前列腺、前列腺增生及前列腺癌组织中核转录因子NF-κB经典通路及选择性通路

摘要

研究背景：
　　核因子ΚB蛋白家族通过经典通路和旁通路发挥各种作用，而目前这两种通路在前列腺癌中的作用尚不明确。
　　目的：
　　我们为了探索出这两种通路在前列腺癌中的作用，分析比较了前列腺正常组织（癌旁组织）、前列腺增生组织(BPH)、前列腺癌组织（PCa）中的核因子ΚB经典通路和旁通路。
　　方法：
　　首先，本文利用Oncomine平台下载了5组前列腺癌数据集，同时利用Biocarta，我们列出了NF-kB信号通路的主要成员。对NF-kB信号通路的基因和下载的数据进行聚类分析。实时定量PCR方法测量PC3、DU145、LNCap、RWPE-1细胞NF-κB1和NF-κB2的基因表达水平；构建炎症模型，大鼠随机分为大肠杆菌组(n=6)和对照组(n=6)，，免疫组化的方法分析磷酸化P50（P-P50）和磷酸化P52（P-P52）蛋白的表达情况。前列腺组织分成3组：A组：PCa(n=68);B组：BPH（n=60）;C组：正常前列腺组织（n=15）。用实时定量PCR方法测量NF-κB1和NF-κB2的基因表达水平。用免疫组化染色的方法分析磷酸化P50（P-P50）和磷酸化P52（P-P52）蛋白的表达情况。最后结合患者临床病理特征分析两条通路和前列腺癌级别、分期及预后的关系。
　　结果：
　　实时定量PCR方法测量发现NFKB1在DU145、LNCaP表达水平低于正常细胞（倍数变化分别为2.96倍及3.74倍，P<0.05），PC3的表达同正常细胞无显著差异（P>0.05）；然而，NFKB2在DU145、LNCaP表达水平高于正常细胞（倍数变化分别为11.86倍及14.78倍，P<0.01），而 NFKB2在 PC3的表达同正常细胞无显著差异（P>0.05）；炎症模型显示经典通路的P50激活，染色主要定位于细胞浆；与前列腺增生组织、正常前列腺组织相比，前列腺癌组织中的NF-κB1基因差异性地下调超过1.5倍，而NF-κB2基因差异性上调超过2倍；A组患者P-P50阳性的比例为26.5％，比B组（88.3%，p=0.005）和C组（100%，p=0.002）显著性降低，A组患者P-P52阳性的比例为42.6%，比B组（11.7%，p=0.009）和C组（6.7%，p=0.008）显著性升高；比较A组中P52、P50免疫组化阳性和阴性患者的术后总体生存率，结果显示p-P52阳性和阴性患者术后总体生存率具有统计学意义的显著性差异，而p-P50则无统计学差异。p-P52阳性患者的预后更差（p=0.019），。
　　结论：
　　我们的实验结果首次发现了NF-κB经典通路和旁通路在前列腺癌中的作用。P-P52可能作为前列腺癌预后的一个指标。

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前言

1.1前列腺癌的流行病学概况

1.2前列腺癌的发病机制

1.3 前列腺癌诊治现状

1.4.炎症和肿瘤的关系

1.5.NF-kB通路与肿瘤

1.6.本研究拟解决问题

材料和方法

2.1 材料

2.2 方法

结果

3.1. 生物信息学分析

3.2. QPCR检测前列腺癌细胞及组织水平的NFKB1及NFKB2的表达情况

3.3免疫组化检测NFKB1及NFKB2在前列腺癌及癌旁正常组织的表达情况

3.4 前列腺炎症模型中NF-kB1、NF-kB2表达情况

讨论

NF-kB经典通道与前列腺癌

NF-kB旁通道与前列腺癌

NF-kB经典通路和旁通路之间的相互关系：

结论

参考文献

缩略词表

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实用型专利

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