人脐带间充质干细胞对耐亚胺培南铜绿假单胞菌生长的抑制作用

摘要

目的:
　　探讨人脐带间充质干细胞的抑菌作用及其相关机制,从而为新生儿细菌感染的防治提供新方法。基础研究部分探讨人脐带间充质干细胞对耐亚胺培南铜绿假单胞菌的生长抑制作用;临床研究部分探讨人脐带间充质干细胞对新生儿呼吸机相关性肺炎患者支气管肺泡灌洗液中的细菌的生长抑制作用。
　　对象与方法:
　　基础研究:耐亚胺培南铜绿假单胞菌由本院细菌室提供。实验组0.5麦氏浓度的耐亚胺培南铜绿假单胞菌加入浓度为1×106/ml的人脐带间充质干细胞悬液0.5ml,对照组0.5麦氏浓度的耐亚胺培南铜绿假单胞菌加入0.5ml的细胞培养液。两组在37℃、5％CO2的培养箱中共培育6h后采用平板计数法计数两组耐亚胺培南培南铜绿假单胞菌的菌落数,采用酶联免疫法及蛋白免疫印记技术检测共培育后上清液中Cathelicidin/LL-37及人β防御素-2的蛋白表达水平,通过配对t检验方法对两组菌落数大小及抗菌肽的水平进行统计学分析。
　　临床研究:选取2012.6-2012.12期间本院新生儿重症监护室中符合支气管肺泡灌洗液培养为阳性、需气管插管机械通气、诊断为呼吸机相关性肺炎的患儿作为研究对象。收集患儿支气管肺泡灌洗液标本,实验组标本中加入浓度为1×106/ml的人脐带间充质干细胞悬液0.5ml、对照组标本中加入0.5ml细胞培养液,两组在37℃、5%CO2的培养箱中共培育6h后采用平板计数法计数细菌菌落数;采用酶联免疫法及蛋白印记技术检测共培育后上清液中Cathelicidin/LL-37及人β防御素-2的蛋白表达水平,通过配对t检验方法对两组菌落数及抗菌肽水平进行统计学分析。
　　结果:
　　1.基础研究:实验组中的耐亚胺培南铜绿假单胞菌的菌落数低于对照组[(6.15±0.36)×107]CFU/mlVS[(8.56±0.30)×108]CFU/ml,(t=-116.49,P<0.01),差异有统计学意义;实验组中Cathelicidin/LL-37和人β防御素-2的水平高于对照组[Cathelicidin/LL-37,(7.99±0.45)ng/mlVS(3.18±0.04)ng/ml,t=78.30,P<0.01;人β防御素-2,(249.38±14.19)pg/mlVS(1.00±0.58)pg/ml,t=78.23,P<0.01],差异有统计学意义;实验组中的共培育液中检测到Cathelicidin/LL-37的特异性蛋白表达,对照组中未检测到其表达。
　　2.临床研究:共收集符合条件的标本31例。实验组支气管肺泡灌洗液标本中的细菌菌落数低于对照组[(2.60±0.67)×104]CFU/mlVS[(1.18±0.32)×105]CFU/ml,(t=-20.19,P<0.01),差异有统计学意义;实验组中Cathelicidin/LL-37和人β防御素-2的水平高于对照组[Cathelicidin/LL-37,(8.98±3.22)ng/mlVS(3.18±1.57)ng/ml,t=17.79,P<0.01;人β防御素-2,(379.87±11.74)pg/mlVS(39.89±2.86)pg/ml,t=37.62,P<0.01],差异有统计学意义。实验组中的Cathelicidin/LL-37的特异性表达量较对照组增强。
　　结论:
　　1.人脐带间充质干细胞对耐亚胺培南铜绿假单胞菌的生长起抑制作用,其可能机制是通过分泌抗菌肽Cathelicidin/LL-37及人β防御素-2来实现的。
　　2.人脐带间充质干细胞对新生儿呼吸机相关性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中细菌生长起抑制作用,其可能机制是通过分泌抗菌肽Cathelicidin/LL-37及人β防御素-2来实现的。

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中英文缩略词表

前言

1.新生儿感染性疾病高发的严峻性

2.新生儿感染性疾病高发的主要原因

3.人类抗菌肽

4. 间充质干细胞

5.研究目的和出发点

对象与方法

1.实验对象

2.实验方法

结果

1.基础实验

2.临床实验

讨论

1. 寻找非抗生素类对抗耐药细菌感染的有效物质，是迫切需要新生儿临床科研工作者解决的问题

2.人脐带间充质干细胞能对耐亚胺培南铜绿假单胞菌的生长起到一定的抑制作用

3.人脐带间充质干细胞对新生儿呼吸机相关性肺炎患儿的支气管肺泡灌洗液中细菌生长起到抑制作用

4.人脐带间充质干细胞与骨髓间充质干细胞同样具有抗感染效应

5.人脐带间充质干细胞的抗感染效应在一定程度上是通过其分泌的抗菌肽来实现的。

6.本研究的局限性

7.展望

结论

参考文献

综述

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致谢

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