伴精神智能发育迟滞癫痫患者SCN3A基因突变筛查及SCN3A与SCN1A相关性分析

摘要

【目的】电压依赖性钠离子通道是神经电活动的基础，与癫痫的关系最为密切。其中Ⅰ型钠离子通道是目前研究的热点，其编码基因SCN1A突变所致的癫痫病例已多达700余例，而关于Ⅲ型钠离子通道在癫痫中的研究则鲜有报道。有研究在1例精神发育迟滞的患者中发现涵盖SCN3A基因的大片段缺失，提示SCN3A基因可能与精神智能发育有关。故本研究拟在癫痫伴精神智能发育迟滞的患者中筛查SCN3A基因，寻找基因突变并分析其突变特点，探讨SCN3A基因与精神智能发育及癫痫的关系。另一方面本研究在具有SCN1A基因突变的癫痫患者中检测SCN3A基因突变，以探讨SCN3A与SCN1A基因的关系，为后续的功能学研究提供理论基础，对指导临床工作及拟定基因特异的个体化治疗具有重要的意义。
　　【方法】从2004-2011年间于我院癫痫中心长期随访的癫痫患者中，根据国际抗癫痫联盟（ILAE）分类标准收集特发性癫痫患者，并根据韦氏智力测验量表（WAIS）、Gesell发育量表等筛选其中精神智能发育迟滞者，详细收集其临床表现、发病规律、脑电图、影像学、精神智能发育及治疗转归等情况，必要时绘制家系图。收集患者及其家族成员的血样并提取 DNA，应用直接测序的方法筛查SCN3A基因所有外显子及外显子-内含子交接区的突变。对新发现的变异，对其父母DNA进行相应变异片段基因序列的筛查，从而明确变异起源，同时设立100例正常对照组加以验证。为明确SCN3A基因与SCN1A基因的关系，采用直接测序的方法对本研究组既往已发现的27例具有SCN1A突变的癫痫患者行SCN3A基因突变的筛查。
　　【结果】共收集58例特发性癫痫患者，这些患者均有不同程度的精神智能发育迟滞，26例患者存在影像学异常。这58例患者中Lennox-Gastaut综合征占10例、部分性癫痫伴热性惊厥附加征（partial epilepsy with febrile seizure plus，PEFS+）6例、全面性癫痫伴热性惊厥附加征（generalized epilepsy with febrile seizure plus，GEFS+）6例、热性惊厥（febrile seizure，FS）2例、热性惊厥附加征（febrile seizure plus，FS+）2例、重症婴儿肌阵挛癫痫（severe myoclonic epilepsy in infant，SMEI）3例、失神发作1例、获得性癫痫性失语（Landau-Kleffner syndrome，LKS）1例，分类不明的特发性癫痫27例。
　　在这58例患者中，我们发现了3例 SCN3A基因编码区的错义突变：c.602C>T/p.A201V、c.905A>G/p.N302S及c.1559G>C/p.R520T。其中1例诊断为FS的患者存在c.602C>T/p.A201V的纯合突变，其中一条突变链来自无症状的母亲（其母为c.602C>C/T杂合突变），另一条为新生突变；1例诊断为GEFS+的患者在其第6号外显子发现杂合错义突变c.905A>G/p.N302S，在其母亲身上发现同样位点的突变，其父未发现有该突变；1例诊断为LGS的患者在其第10号外显子发现杂合错义突变 c.1559G>C/p.R520T，在其父亲身上发现同样位点的突变，其母未发现有该位点的突变。
　　除此之外，我们亦对27例有SCN1A基因突变的患者进行SCN3A基因突变的筛查，此27例患者中SME13例、PEFS+10例、GEFS+1例、FS1例、分类不明的特发性癫痫2例。其中21例患者有不同程度的精神智能发育迟滞，6例患者精神智能发育正常。通过直接测序，我们发现了SCN3A基因编码区的1例错义突变。1例诊断为FS的患者在第10号外显子存在错义突变c.1589A>G/p.D530G。以上所有变异在100例正常对照组中均未有发现。
　　【结论】SCN3A突变发生率低，基因突变临床表型多样，所涉及的疾病谱从自限性的FS到重症的LGS、SME，且绝大多数伴有智能发育障碍，提示在癫痫伴智能发育迟滞的患者中可行SCN3A基因突变筛查。此外，在1例轻型FS患者中同时筛查到SCN1A和SCN3A基因突变，提示SCN3A可能是SCN1A的修饰基因。

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缩略词表

中文摘要

英文摘要

前 言

研究对象和方法

1、研究对象

2、临床评估

3、实验材料

4、技术路线

5、实验方法

结 果

1、58例伴精神智能发育迟滞癫痫患者的一般临床资料

2、58例伴精神智能发育迟滞癫痫患者中SCN3A基因筛查结果

3、 27例具有SCN1A基因突变的热性惊厥相关性患者的SCN3A基因筛查结果

4、 SCN3A基因突变临床特点及保守性分析

5、 SCN3A突变特点总结

讨 论

1、SCN3A基因与癫痫的相关性

2、SCN3A与精神智能发育的关系

3、SCN3A与癫痫伴热性惊厥的关系

4、SCN1A与SCN3A的关系

结 论

展 望

参考文献

致谢

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