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家蝇幼虫Cecropin和Attacin抗菌肽基因的克隆及其表达与活性初步研究

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目录

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摘要

1前言

1.1研究背景

1.2研究目的

1.3研究内容

2家蝇幼虫Cecropin和Attacin抗菌肽基因的克隆及其序列分析

2.1材料和方法

2.2结果

2.2.1家蝇幼虫总RNA质量的鉴定及产量的测定

2.2.2pUCm-T/Cecropin重组质粒的构建

2.2.3pUCm-T/Attacin重组质粒的构建

2.2.4序列的生物信息学分析1

2.2.4序列的生物信息学分析2

2.3讨论

3 Cecropin和Attacin基因的原核表达及其生物学活性研究

3.1材料与方法

3.2结果

3.3 讨论

4 Cecropin和Attacin基因的真核表达及其生物学活性研究

4.1材料与方法

4.2结果

4.3讨论

5总结

参考文献

文献综述Ⅰ:昆虫抗菌肽研究现状与展望

文献综述Ⅱ:生物信息学在蛋白质结构与功能预测中的应用

附录1-8:重组质粒测序图

附录9:载体图谱

附录10:主要中英文对照

附录11:在读硕士期间科研情况

致谢

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摘要

本研究目的扩增家蝇幼虫Cecropin和Attacin抗菌肽基因cDNA序列,分别克隆入pET30a(+)和pGEX-4T-1原核表达载体及pcDNA3.1(+)真核表达载体,表达、分离、纯化各自的表达产物,并初步研究家蝇Cecropin和Attacin抗菌肽的生物活性功能,成功提取了高质量的家蝇幼虫总RNA并逆转录为cDNA,扩增得到了家蝇幼虫Cecropin和Attacin两个抗菌肽基因的全长cDNA序列,成功构建了原核表达重组质粒及真核表达重组质粒,纯化后的原核和真核表达产物具有生物学活性,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础。

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