加味大柴胡汤对阻塞性黄疸大鼠中胆红素主要转运子的表达和肝脏能量代谢改变的影响

摘要

目的：通过研究加味大柴胡汤对阻塞性黄疸大鼠中MRP2的表达与肝细胞能量改变的影响，证明加味大柴胡汤能通过上调MRP2表达，降低胆汁酸的代谢，改善肝细胞的能量代谢紊乱，减轻肝脏的损伤，为加味大柴胡汤在临床上的应用提供更充分的理论依据。 方法：制作急性阻塞性黄疸大鼠模型，分为7、14、21天3个时段，每个时段分3组，即：(1)假手术+生理盐水组(2ml/次，2次/日，po)(SO组)；(2)胆总管结扎+生理盐水组(2ml/次，2次/日，po)(BDL+NS组)；(3)胆总管结扎+加味大柴胡汤组(2ml/次，2次/日，po)(BDL+MMDB组)。每组6只清洁级SD大鼠，在各时段取大鼠肝组织及下腔静脉血，检测AST、ALB、TB、TBA；用光学显微镜观察肝组织的病理改变；用免疫组化检测MRP2蛋白表达；用RT-PCR检测MRP2mRNA的表达；用肝组织匀浆后检测ATP、EC。 结果：1血清学TBA测定胆总管结扎7天时，BDL+MMDB组与BDL+NS组外周血TBA比SO组均上升，且后者明显。BDL+MMDB组与SO组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)，但BDL+MMDB组与BDL+NS组相比，差异有统计学意义(P＜0.01)。胆总管结扎14、21天时，BDL+MMDB组与BDL+NS组外周血TBA持续升高，且后者增高更明显。BDL+MMDB组与SO组相比，差异有统计学意义(P＜0.01)。BDL+MMDB组与BDL+NS组相比，差异也有统计学意义(P＜0.05)。 2肝组织MRP2蛋白的表达MRP2蛋白的染色阳性产物分布于细胞浆/膜中。各时段检测结果：SO组肝细胞中显著表达。胆总管结扎7、14、21天时，BDL+MMDB组与BDL+NS组MRP2蛋白表达持续显著减弱，且后者减弱更明显。同时段中BDL+MMDB组与SO组相比、BDL+MMDB组与BDL+NS组相比，差异均有统计学意义(P＜0.01)。 3肝组织MRP2mRNA的表达正常肝组织中MRP2mRNA的表达明显。胆总管结扎7、14、21天时，BDL+MMDB组与BDL+NS组MRP2蛋白表达持续显著减弱，且后者减弱更明显。同时段中BDL+MMDB组与SO组相比、BDL+MMDB组与BDL+NS组相比，差异均有统计学意义(P＜0.01)。 4肝组织ATP,EC含量测定胆总管结扎7天时，BDL+NS组肝组织ATP、EC值降低，BDL+MMDB组变化不明显。BDL+MMDB组与SO组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。BDL+MMDB组与BDL+NS组相比，差异有统计学意义(P＜0.01)。胆总管结扎14天时，BDL+NS组肝组织ATP、EC值持续降低，BDL+MMDB组ATP、EC值也降低。BDL+MMDB组与SO组相比，BDL+MMDB组与BDL+NS组相比，差异均有统计学意义(P＜0.05)。胆总管结扎21天时，BDL+NS组肝组织ATP、EC值显著降低，BDL+MMDB组ATP、EC值持续降低。BDL+MMDB组与SO组相比，差异有统计学意义(P＜0.01)。BDL+MMDB组与BDL+NS组相比，差异也有统计学意义(P＜0.05)。 结论：1胆道梗阻后，外周血清中TBA的含量增加，并随着梗阻时间的延长逐步加重。说明胆道梗阻后肝脏存在严重的胆汁酸代谢障碍，这也是肝脏功能损伤的重要原因。 2胆道梗阻后，肝细胞内ATP、EC含量减少，并随着梗阻时间的延长逐步加重。说明胆道梗阻后肝细胞内存在严重的能量代谢障碍。 3胆道梗阻后，肝组织中MRP2蛋白与MRP2mRNA的表达明显减弱，并随着梗阻时间的延长逐步加重，提示MRP2在阻塞性黄疸中发挥重要的作用。4加味大柴胡汤可以增加MRP2蛋白及MRP2mRNA的表达，降低胆汁酸，改善肝细胞的能量代谢，减轻肝脏的损伤。因此，可以作为治疗阻塞性黄疸的有效药物。

目录

学位论文独创性声明及学位论文知识产权声明

1前言

2材料与方法

3实验结果

4讨论

5小结

参考文献

胆红素主要转运子MRP2基因与阻塞性黄疸

图片资料

致谢

附录1：缩略语

附录2

附录3：