海洋生物Ⅰ号不同提取组分的抗肿瘤活性研究

摘要

本研究的目的是提取、分离和纯化海洋生物Ⅰ号抗肿瘤活性组分，探讨各组分对人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞和人高分化鼻咽癌CNEl细胞两种细胞系的作用。 [方法]乙醇冷浸渍法提取，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇系统溶剂分离，大孔吸附树脂柱层析法进一步纯化分离；MTT法测定各提取物对Raji、CNEl两种细胞系的生长抑制作用；细胞计数法测定提取物对肿瘤细胞生长曲线的影响；流式细胞术检测提取物对肿瘤细胞周期的影响。 [结果]海洋生物Ⅰ号经提取分离得到3种提取物A、B和C，提取率分别为0.17％、0.14％和0.4％。抗肿瘤活性测定结果显示，3种提取物对Raji细胞和CNEl细胞生长均有不同程度的抑制作用，抑制率随药物浓度的增高而增高，其中提取物B作用最强，提取物C次之，提取物A作用最弱。统计结果显示，12h、24h和48h3个时间点提取物B和提取物C的抑制率比较，差异具有显著性(P＜0.05)；A和B、A和C的抑制率两两比较，差异具有非常显著性(P＜0.01)。提取物A、B和C作用于Raji细胞48h后的IC50值分别为399.77μg/ml、193.61μg/ml和204.90μg/ml，作用于CNEl细胞的IC50值分别为804.14μg/ml、397.65μg/ml和611.94μg/ml。不同浓度的提取物B均使Raji细胞和CNE1细胞的生长曲线变为低平，各浓度组与空白对照组相比，差异具有非常显著性(P＜0.01)。流式细胞术测定结果显示，不同浓度的提取物B均可以引起两种细胞系G1期细胞增多，S期细胞减少，并存在明显的量效关系。大孔吸附树脂柱层析法将提取物C进一步纯化分离得到5个组分C1、C2、C3、C4和C5，提取率分别为46.92％、7.02％、3.57％、4.76％和8.57％。抗肿瘤活性测定结果显示，C1、C2和C3组分对Raji和CNE1细胞的生长抑制作用不明显，而C4和C5组分对两种细胞系的生长均有显著的抑制作用，C5组分的抑制作用最强，且抑制率随药物浓度的增高而增高。C3和C2、C3和C1的抑制率差异不大；其他的两组间的比较，差异具有非常显著性(P＜0.01)。C1、C2、C3、C4和C5组分作用于Raji细胞48h后的IC50值分别为272.27μg/ml、8729.28μg/ml、3793.82μg/ml、113.49μg/ml和78.59μg/ml，作用于CNE1细胞48h后的IC50值分别为1675.27μg/ml、4021.66μg/ml、557.08μg/ml、181.31μg/ml和91.84μg/ml。 [结论](1)从海洋生物Ⅰ号提取到的3种提取物中，提取物B的抗肿瘤活性最强，提取物C次之，它们可明显抑制Raji细胞和CNE1细胞的生长；(2)海洋生物Ⅰ号提取物B使肿瘤细胞周期阻滞于G1期；(3)大孔吸附树脂柱层析法进一步纯化分离提取物C得到的5种组分中，低极性的C4和C5组分抗肿瘤活性明显较强，其中C5组分最强。

目录

学位论文独创性声明及学位论文知识产权声明

摘要

1前言

2材料与方法

3结果

4讨论

5小结

参考文献

文献综述天然抗癌药物开发研究中的关键问题

致谢

附录缩写词中英文对照