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低浓度ATP对低分化鼻咽癌细胞迁移的影响

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摘要

1前言

2材料与方法

3.结果

4讨论

小结

参考文献

文献综述容积激活性氯通道与神经胶质瘤细胞迁移

致谢

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摘要

本文主要研究了低浓度ATP对CNE-2Z细胞迁移的影响,并探讨低浓度ATP对CNE-2Z细胞迁移影响的作用机制。 方法: 1)Transwell小室法完成CNE-2Z细胞的迁移过程;2)用ScionImage图像分析软件测量CNE-2Z细胞直径和容积;3)MTT法+Transwell小室法测定细胞迁移抑制率;4)台盼蓝活细胞染色法测定药物对CNE-2Z细胞的细胞毒作用。 结果: 1)低浓度的ATP(100μmol/L)可以使CNE-2Z细胞的迁移率由(15.23±0.26)%(n=3)提高到(26.00±0.25)%(n=3,P<0.01),迁移率增加的百分比为(67.03±4.68)%。 2)嘌呤受体2的抑制剂反应蓝2抑制低浓度ATP(100μmol/L)对CNE-2Z细胞迁移率的影响,抑制率为(84.15±1.11)%(n=3,P<0.01)。 3)氯通道阻断剂NPPB和Tamoxifen(终浓度分别为100μmol/L和20μmol/L)能够完全抑制低浓度ATP对CNE-2Z细胞迁移率的促进作用,并且其迁移率还低于对照组。 4)低浓度ATP灌流CNE-2Z细胞时,细胞容积减少(7.41±0.67)%(n=23,P<0.01),去除ATP后细胞容积逐渐恢复正常。 5)渗透压对CEN-2Z细胞的迁移有影响。低渗组的细胞的迁移率显著高于等渗对照组,高渗组的细胞迁移率低于等渗对照组。正常对照组细胞的迁移率为(15.23±0.26)%,等渗组的迁移率为(13.01±1.33)%(n=3,P>0.5)。47%高渗,23%高渗,23%低渗,47%低渗的迁移率分别为(6.71±1.11)%(n=3,P<0.01),(8.27±0.75)%(n=3,P<0.01),(18.47±0.70)%(n=3,P<0.05),(20.01±0.83)%(n=3,P<0.01)。 6)低浓度ATP对CNE-2Z细胞迁移的影响有Cl-依赖性。用对氯通道没有通透性的或有低度通透性的葡萄糖酸钠、甘露醇置换Cl-后,低浓度ATP对细胞迁移率的影响消失。正常等渗条件下,加入低浓度ATP后CNE-2Z细胞的迁移率是(26.73±0.21)%(n=3),用葡萄糖酸钠、甘露醇置换Cl-后,再加入低浓度ATP后CNE-2Z细胞的迁移率分别是(0.93±0.07)%(n=3,P<0.01),(0.85±0.06)%(n=3,P<0.01)。 结论:低浓度的ATP可以增加CNE-2Z细胞的迁移率,这种结果有赖于Cl-的存在,低浓度ATP影响CNE-2Z细胞迁移率可能是,直接与其通过P2Y受体激活氯通道开放有关,或者与氯通道开放引起的体积变小、细胞在迁移过程中的形态改变能力提高有关。

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