三七总甙对大鼠自身免疫性睾丸炎预防作用的实验研究

摘要

【目的】 通过观察三七总甙对自身免疫性睾丸炎模型鼠睾丸病理和TNF-α表达及分泌等的影响，研究其对自身免疫性睾丸炎的预防作用，并探讨其预防作用的机制。 【方法】 56只SD雄性大鼠随机取8只为正常对照组(A组)，其余为自身免疫性睾丸炎模型组。按照经典方法建立睾丸炎模型后，随机分为模型组(B组)和三七总甙低、中、高剂量预防组(分别是C、D、E组)。从造模的次日起，各预防组每天给予相应剂量三七总甙灌胃，模型组和正常对照组给予生理盐水灌胃。80d后取材并测右侧睾丸重量(左侧睾丸用于造模)和生精小管直径；HE染色观察各组睾丸病理形态变化；免疫组化方法检测睾丸组织 TNF-α的表达；ELISA 法检测血清 TN-α含量：RIA 法检测血清睾酮含量。 【结果】 1．大鼠右侧睾丸重量、睾丸脏器系数和生精小管直径的检测 (1)与正常对照组右侧睾丸重量、睾丸脏器系数和生精小管直径比较，模型组和三七总甙低剂量预防组显著降低(P<0.05)，而三七总甙中、高剂量预防组无明显变化(P>0.05)。 (2)与模型组右侧睾丸重量、睾丸脏器系数和生精小管直径比较，三七总甙低剂量预防组无明显变化(P>0.05)，而三七总甙中、高剂量预防组显著升高(P<0.05)。在各剂量预防组中比较，三七总甙中、高剂量预防组明显优于三七总甙低剂量预防组(P<0.05)。 2．睾丸病理形态的观察 (1)肉眼观察模型组右侧睾丸萎缩，外观色白。光镜观察精母细胞和精子细胞坏死、脱落，剩余支持细胞和精原细胞；睾丸间质水肿、渗出，炎症细胞增生浸润；生精小管排列紊乱，甚至塌陷、消失。 (2)三七总甙低剂量预防组右侧睾丸外观、组织结构与模型组相似，三七总甙中、高剂量预防组睾丸外观红润，炎症程度明显减轻。三七总甙中剂量预防组镜下观察生精小管中有完好的生精上皮细胞；三七总甙高剂量预防组生精上皮形态接近正常，腔内可见大量正常精子。 3．睾丸组织及血清中TNF-α的检测 (1)正常对照组和三七总甙高剂量预防组睾丸间质细胞TNF-α呈阳性表达，生精上皮呈弱阳性，生精小管基底膜几乎不表达；模型组和三七总甙低、中剂量预防组间质炎症细胞数量增多，TNF-α表达明显增强。与正常对照组血清TNF-α含量比较，模型组和三七总甙低、中剂量预防组明显升高(P<0.01)，而三七总甙高剂量预防组无明显变化(P>0.05)。 (2)三七总甙低剂量预防组睾丸组织TNF-α表达强度接近模型组，三七总甙中、高剂量预防组TNF-α表达强度明显降低，阳性细胞数量明显减少。与模型组血清TNF-α含量比较，三七总甙低剂量预防组无明显变化(P>0.05)，而三七总甙中、高剂量预防组显著降低(P<0.01)。在各剂量预防中比较，三七总甙中、高剂量预防组明显优于三七总甙低剂量预防组(P<0.05)。 4．血清睾酮含量的测定 (1)与正常对照组血清睾酮含量比较，模型组和三七总甙低、中剂量预防组显著降低(P<0.01)，而三七总甙高剂量预防组无明显变化(P>0.05)。 (2)与模型组血清睾酮含量比较，三七总甙低剂量预防组无明显变化(P>0.05)，而三七总甙中、高剂量预防组显著升高(P<0.05)。在各剂量预防组中比较，三七总甙中、高剂量预防组明显优于三七总甙低剂量预防组(P<0.05)。 5．血清TNF-α和血清睾酮含量的相关性分析 自身免疫性睾丸炎模型组大鼠血清TNF-α含量与血清睾酮含量呈负相关关系(r=0.876，P<0.05)。 【结论】 (1)模型组睾丸病理损伤严重，三七总甙各剂量预防组可显著减轻睾丸炎症损伤程度，且呈剂量依赖性。 (2)三七总甙可能通过下调TNF-α表达与分泌，抑制睾丸间质充血水肿、炎症细胞浸润，进而调节睾酮分泌，保护生精上皮免脱落，延缓自身免疫性睾丸炎的进展。

目录

声明

1前言

1.1研究背景

1.2研究目的

1.3研究内容

2材料与方法

2.1实验动物和饲养条件

2.2主要实验仪器

2.3主要药品与试剂

2.4试剂配制

2.5实验方法

2.6统计学处理

3结果

4讨论

5小结

参考文献

文献综述　　自身免疫性睾丸炎中间质巨噬细胞的研究进展

致谢

附录