丹参水溶性有效成分原儿茶醛对泼尼松致小鼠骨损害的预防作用

摘要

[目的]
　　 用糖皮质激素类药物醋酸泼尼松造成小鼠以免疫抑制及骨丢失为特征的表现，观察丹参水溶性有效成分原儿茶醛对此的预防作用，并与丹参进行比较，为原儿茶醛用于糖皮质激素性骨质疏松的治疗提供参考。
　　 [方法]
　　 1.实验分组
　　 SPF级的6-8周龄BALB/C小鼠共80只，随机分成8组，每组10只，分组如下：
　　 (1)正常对照组(NC)：给予蒸馏水0.1ml/10g/d。
　　 (2)泼尼松模型组(GC)：灌胃给予醋酸泼尼松混悬液4mg/kg/d。
　　 (3)原儿茶醛对照组(PC)：灌胃给予原儿茶醛混悬液8mg/kg/d。
　　 (4)高剂量原儿茶醛实验组(GHP)：先灌胃给予醋酸泼尼松混悬液4mg/kg/d，3小时后灌胃给予原儿茶醛8mg/kg/d。
　　 (5)中剂量原儿茶醛实验组(GMP)：先灌胃给予醋酸泼尼松混悬液4mg/kg/d，3小时后灌胃给予原儿茶醛4mg/kg/d。
　　 (6)低剂量原儿茶醛实验组(GLP)：先灌胃给予醋酸泼尼松混悬液4mg/kg/d，3小时后灌胃给予原儿茶醛2mg/kg/d。
　　 (7)复方丹参片实验组(GD)：先灌胃给予醋酸泼尼松混悬液4mg/kg/d，3小时后灌胃给予复方丹参片8mg/kg/d。
　　 (8)丹参水提液实验组(GDS)：先灌胃给予醋酸泼尼松混悬液4mg/kg/d，3小时后灌胃给予丹参水提液3.25g/kg/d。
　　 2.实验方法
　　 所有小鼠均自入笼饲养一周后开始给药，每天一次，共给药20天。实验过程中每天观察小鼠进食、饮水、活动情况等变化并记录，3d称体重1次，并按体重变化调整给药量。实验结束后，处死小鼠取左股骨及第4、5腰椎分别测量其骨物理指标、骨重、骨硬度等参数，以此评价实验小鼠骨量和骨质量情况；分离脾、肝脏、肾脏、大脑、肌肉，称取湿重，计算相关脏器的重量指数。同时检测脑内单胺氧化酶的含量。
　　 [结果]
　　 1.每天灌胃给予小鼠醋酸泼尼松4mg/kg，连续20天，可以造成小鼠体重和免疫器官重量减轻，大脑单胺氧化酶升高及骨硬度减少，表现在：
　　 (1)醋酸泼尼松模型组小鼠出现体重减轻(与正常对照组相比P<0.01)，重要脏器比下降(脾脏、胸腺重量与正常对照组相比P<0.05)，大脑单胺氧化酶升高(活性与正常对照组相比P<0.05)。
　　 (2)骨硬度减少：醋酸泼尼松模型组股骨及腰椎的骨硬度均低于正常对照组(P<0.05)。
　　 2.原儿茶醛高剂量(8mg/kg/d)、中剂量(4mg/kg/d)和低剂量(2mg/kg/d)的灌胃给药20d后有效预防醋酸泼尼松对小鼠引起的部分不良反应，具体表现在：
　　 (1)原儿茶醛对醋酸泼尼松小鼠的体重无明显影响(P>0.05)。
　　 (2)原儿茶醛能对抗醋酸泼尼松所引起的肌肉、免疫器官和大脑的萎缩：原儿茶醛实验组小鼠的脾脏重量比、胸腺重量比、肌肉重量比、大脑重量比均较醋酸泼尼松模型组升高(P<0.05)。
　　 (3)原儿茶醛可对抗醋酸泼尼松所引起的股骨骨硬度下降：原儿茶醛实验组小鼠的股骨硬度较醋酸泼尼松模型组升高(P<0.05)，同时，对椎骨的骨硬度有增加趋势；不同剂量原儿茶醛组骨硬度相当，各组间的差异无统计学意义。
　　 (4)复方丹参片可改善醋酸泼尼松所引起的椎骨骨硬度下降：复方丹参片明显增加模型小鼠椎骨的骨硬度，丹参水提液组小鼠骨硬度与醋酸泼尼松模型组相比，骨硬度有增加的趋势，但其差异无统计学意义。
　　 [结论]
　　 1.长期给予醋酸泼尼松灌胃，可致小鼠体重和免疫器官重量减轻，大脑单胺氧化酶升高及骨骨质量下降，表现为骨重量和骨硬度同时降低。
　　 2.在醋酸泼尼松给药的同时给予原儿茶醛，可有效预防醋酸泼尼松所致小鼠骨损害，使骨重量及股骨硬度增加，抗骨折能力增加。
　　 3.在醋酸泼尼松给药的同时给予复方丹参片，可增加模型小鼠的腰椎骨硬度和增强其抗骨折能力。