n-3PUFAs对N-甲基-N-亚硝基脲灌肠诱导大鼠结直肠癌的影响

摘要

目的：运用N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea，MNU)灌肠诱导大鼠结直肠癌，模拟人类原位结直肠癌的发生、发展过程及生长特点，观察n-3多不饱和脂肪酸（n-3 Polyunsaturated fatty acids，n-3PUFAs）对大鼠结直肠癌的影响，从而阐述n-3PUFAs是否能预防人类结直肠癌的发生并初步探讨其机制。
　　 方法：将60只SD大鼠随机分成对照组和实验组，雌雄各半;另取10只SD大鼠做空白对照组，雌雄各半。三组大鼠均给予大小鼠生长用饲料喂养，实验组用n-3PUFAs进行灌胃，对照组和空白组用等量的蒸馏水灌胃。用MNU对实验组和对照组的SD大鼠进行灌肠;用等量的蒸馏水对空白组大鼠灌肠。实验过程中观察大鼠的精神、饮食、活动、排便、体重等临床表现。16周后解剖大鼠，观察大鼠肿瘤的生长、大小、数目。HE切片判断肿瘤的病理类型，观察癌组织的浸润深度。用气相色谱方法测定对照组和实验组SD大鼠红细胞膜内n-3PUFAs的浓度。采用免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）SP法检测Caspase-3、COX-2在对照组和实验组大鼠结肠癌组织、癌旁组织、及正常组织中的阳性表达情况。用SPSS17.0统计软件分析比较对照组和实验组大鼠的体重、肿瘤发生率、浸润深度、红细胞膜n-3PUFAs的浓度及Caspase-3、COX-2的表达等。
　　 结果：解剖时对照组（295.85±42.92）g和实验组（345.75±35.11）g大鼠体重有明显统计学差异（t=-4.929，P＜0.01）。对照组肿瘤发生率为90％，实验组为66.67％，两组的肿瘤发生率有统计学差异(x2=4.812，P＜0.05)，而肿瘤多发率差异无统计学意义(x2=1.021，P＞0.05)。肿瘤病理结果为非典型增生和腺癌表现，对照组腺癌占肿瘤发生的96.3％，实验组为70％，两者有统计学差异（x2=4.365，P＜0.05）。对照组腺癌浸润深度主要达肌肉层，实验组主要达粘膜及粘膜下层，在各层两组浸润深度差异有统计学意义(P＜0.05)。对照组大鼠红细胞n-3PUFAs浓度（3.38±0.81）μg/ml和实验组（8.39±1.79）μg/ml之间有显著统计学差异（t=-13.954，P＜0.01）。Caspase-3蛋白在对照组和实验组癌组织中的阳性表达有统计学差异(x2=4.183，P＜0.05)，COX-2蛋白阳性表达差异无统计学意义（x2=0.337，P＞0.05）。
　　 结论：⑴用MNU灌肠诱导SD大鼠结直肠癌模型，模拟人类原位结直肠癌的发生、发展过程，此种方法简单、易行、成功率高，是一种较好的大鼠结直肠癌造模方法。⑵n-3PUFAs对SD大鼠结直肠癌的发生、发展起到一定的抑制作用。⑶n-3PUFAs抗肿瘤作用机制可能与增加癌组织内的细胞凋亡有关。⑷服用n-3PUFAs能够提高SD大鼠红细胞膜内n-3PUFAs浓度。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

3 结果

4 讨论

5 小结

参考文献

综述

附图

致谢

附录一：英文缩写中文对照

附录二：读硕士期间的科研情况