8-己基小檗碱联用氟喹诺酮类药物抗金色葡萄球菌作用及增效机理研究

摘要

临床上由于抗生素的长期应用，细菌的耐药菌株不断增加，选择合适、敏感的抗生素联用可缩短病程，提高疗效，特定的联用还可有效降低耐药菌株的耐药性。试验证明氟喹诺酮类药物联用小檗碱治疗细菌性疾病就是这种特定的配伍。而小檗碱是黄连的主要活性成分，在小檗碱分子中接入亲脂性基团后合成的小檗碱衍生物的抑菌活性显著增加。本研究选择临床常用的诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星等三种喹诺酮类药物和8-己基小檗碱联用进行体外抑菌实验，并探讨其提高抗菌效力的机制，希望能为临床应用提供理论依据。
　　采用二倍稀释法，选择8-己基小檗碱和诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星联用进行抗金色葡萄球菌实验，结果显示其最低抑菌浓度MIC恩诺沙星为3.125 ppm，左氧氟沙星为25 ppm，诺氟沙星为12.5 ppm，8-己基小檗碱为4 ppm。筛选恩诺沙星和诺氟沙星与8-己基小檗碱联用，用棋盘稀释法测出分级抑制浓度指数FIC，结果显示8-己基小檗碱联用恩诺沙星FIC为0.125，8-己基小檗碱联用诺氟沙星FIC为0.3125，都小于0.5;表明8-己基小檗碱联用诺氟沙星、恩诺沙星有较好的抗菌协同作用。实验表明其最佳协同比例8-己基小檗碱∶恩诺沙星为2∶1，8-己基小檗碱∶诺氟沙星为2∶1。通过测定金色葡萄球菌菌悬液的光密度来确定菌液浓度，绘制该菌在一定条件下的生长曲线，检测8-己基小檗碱与诺氟沙星、恩诺沙星联用后金色葡萄球菌生长情况，结果显示金黄色葡萄球菌的对数生长期明显被抑制。
　　采用紫外分光光度法，测定小檗碱、8-己基小檗碱在酸、碱、中性环境中油水分配系数对数值(LogP)，探讨物质在水油两相中分配情况。结果表明，经修饰后的化合物8-己基小檗碱，增大LogP值，提高亲油性，从而增强膜吸收，具有更好的生物利用度。
　　应用细胞破碎技术，用薄层色谱法鉴别在金色葡萄球菌菌体内8-己基小檗碱，用紫外分光光度测定金色葡萄球菌中8-己基小檗碱的含量。结果表明，组方8-己基小檗碱∶恩诺沙星为1∶2时，细菌中8-己基小檗碱的含量为67％;组方8-己基小檗碱∶诺氟沙星为1∶2时，细菌中8-己基小檗碱的含量为17％;单方8-己基小檗碱为7.5％。结果表明，联合用药时，金色葡萄球菌吸收8-己基小檗碱含量明显高于单方8-己基小檗碱。

目录

声明

摘要

第1章 文献综述

1．1 黄连研究概况

1．2 小檗碱衍生物研究现状

1．3 中西药联用抗菌作用

1．4 小檗碱与氟喹诺酮类抗生素联用概述

第2章 绪论

2．1 研究的目的和意义

2．2 研究内容

第3章 8-己基小檗碱与氟喹诺酮类药物联用对G+抑制活性研究

3．1 实验材料

3．1．1 供试菌种

3．1．2 药品

3．1．3 培养基

3．1．4 主要仪器

3．2 实验方法

3．2．1 最低抑菌浓度(MIC)的测定

3．2．2 FIC值测定

3．2．3 金黄色葡萄球菌生长曲线的绘制

3．3 实验结果

3．3．1 最低抑菌浓度(MIC)的测定结果

3．3．2 FIC值测定结果

3．3．3 金黄色葡萄球菌生长情况

3．4 讨论与小结

第4章 8-己基小檗碱的油水分配系数研究

4．1 材料

4．1．1 材料与试剂

4．1．2 仪器

4．2 方法与结果

4．2．1 待测定的8-己基小檗碱化合物结构式

4．2．2 8-己基小檗碱的含量测定UV方法的建立

4．2．3 线性关系考察

4．2．4 精密度试验

4．2．5 重复性试验

4．3 8-己基小檗碱表观油水分配系数的测定

4．4 讨论与小结

第5章 金色葡萄球菌中8-己基小檗碱含量测定

5．1 实验材料

5．1．1 材料和试剂

5．1．2 仪器

5．2 实验方法

5．2．1 薄层色谱法鉴别

5．2．2 UV测定细菌中8-己基小檗碱含量

5．2．3 金色葡萄球菌中8-己基小檗碱含量

5．3 实验结果

5．3．1 8-己基小檗碱定性鉴别

5．3．2 金色葡萄球菌中含量测定

5．4 讨论与小结

第6章 结论与展望

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的文章