二氧化碳气腹对裸鼠卵巢癌移植瘤中VEGF及VEGFR--2表达的影响

摘要

目的：随着腹腔镜技术在妇科领域飞速发展，一些更为复杂的、以往只能通过开腹进行的手术如广泛全子宫切除术+盆腔淋巴结清扫术等如今也已能在腹腔镜下进行。尽管如此，腹腔镜手术在卵巢癌中的应用仍备受争议，主要是因不少专家学者认为:以二氧化碳(CO2)作为气腹介质的腹腔镜手术可能会增加卵巢癌细胞腹腔内转移、扩散的风险，但对其发生的机制却未能阐明。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)，作为迄今被发现的最强的促血管生成因子，在癌症增殖、转移过程中起着重要作用，而其特异性受体-血管内皮生长因子受体-2（vascular endothelial growth factor，VEGFR-2）已被证实是其促血管生成作用中的主要受体。CO2气腹对VEGF及VEGFR-2表达的影响目前少有研究。本研究利用本课题组前期研究收集的裸鼠卵巢癌移植瘤组织，对组织中VEGF及VEGFR-2基因的表达情况进行检测，以探讨CO2气腹对卵巢癌增殖、转移的影响并推断其可能发生机制，为临床上腹腔镜手术用于治疗卵巢恶性肿瘤的安全性提供动物实验参考依据。 方法：主要采用实时荧光定量PCR(Real Time-PCR)、免疫组织化学法及蛋白质免疫印迹(western blot)检测四组（单纯麻醉组即对照组，开腹组，CO2气腹0.5h组及CO2气腹1h组）裸鼠卵巢癌移植瘤组织中VEGF及VEGFR-2mRNA和蛋白的表达情况。 结果：⑴RT-PCR结果:在对照组、开腹组、CO2气腹0.5h组及CO2气腹1h组四组裸鼠卵巢癌移植瘤组织中，每组10例样本（分别来自不同的裸鼠），VEGFmRNA的相对表达量呈递增趋势，以CO2气腹1h组为著，与对照组、开腹组及CO2气腹0.5h组间比较均有统计学差异(P＜0.05);对照组、开腹组及CO2气腹0.5h组间两两比较均无统计学差异（P＞0.05）;VEGFR-2 mRNA的表达情况与VEGF mRNA类似，在对照组、开腹组、CO2气腹0.5h组及CO2气腹1h组中呈升高趋势，但仅CO2气腹1h组与其它三组比较有统计学差异(P＜0.05)，另外三组之间两两比较无统计学意义(P＞0.05); VEGF和VEGFR-2 mRNA之间存在直线关系(R2=0.915，P=0.0433)，VEGFR-2 mRNA随着VEGF mRNA表达的升高而升高。⑵免疫组化结果:在40例卵巢癌移植瘤组织中，VEGF表达阳性的有38例，VEGFR-2表达阳性的有37例，表达率分别为95％与92.5％。二者在四组卵巢癌移植瘤组织中的阳性表达率均无统计学意义(P＞0.05);但VEGF与VEGFR-2蛋白在裸鼠卵巢癌移植瘤组织中的表达呈正相关性(r=0.806，P＜0.005)。⑶Western blot结果:与RT-PCR结果一致，VEGF及VEGFR-2蛋白表达水平在四组卵巢癌移植瘤组织中均以CO2气腹1h组最高，与对照组、开腹0.5h组、CO2气腹0.5h组之间比较差异有统计学意义(P＜0.05），而对照组、开腹组及CO2气腹0.5h组之间两两比较无统计学意义(P＞0.05)。VEGF和VEGFR-2裸鼠卵巢癌移植瘤组织中的表达存在直线关系，VEGFR-2蛋白随着VEGF蛋白表达的升高而升高。(R2=0.9899，P=0.0051)。 结论：①CO2气腹可能通过促进裸鼠卵巢癌移植瘤组织中VEGF及VEGFR-2的表达而促进卵巢癌移植瘤的增殖、转移。②CO2气腹的作用时间可能是其影响裸鼠卵巢癌移植瘤增殖、转移的重要因素之一。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．2 技术路线图

2．3 实验方法

2．4 统计方法

3 结果

4 讨论

5 小结

参考文献

综述 二氧化碳气腹影响盆腹腔恶性肿瘤侵袭、转移的可能机制

致谢

附表一 缩写词中英文对照

附录二：在读硕士期间科研情况