鹤庆产玛咖化学成分研究及不同产地玛咖的HPLC指纹图谱建立

摘要

背景：玛咖（Lepidium meyenii Walp., Maca)为十字花科（Brassicaceae)独行菜属（Lepidium)一年生或两年生草本植物，原产于秘鲁4000a4500 m的安第斯山区，长期以来被当地土著人当作蔬菜和保健药物食用，素有‘秘鲁人参’的美誉。现代药理学研究证明，玛咖具有改善性功能、提高生育能力、增强免疫力、抗疲劳、预防骨质疏松、改善更年期综合症等多种功效，因此得到各国消费者的青睐。由于受限于原产地土地资源和种植技术的影响，玛咖的产量远远无法满足消费者的消费需求，联合国粮农组织（FAO)建议世界各国推广对玛咖的种植，将玛咖作为重要营养食品进行推广，我国自20世纪90年代开始在云南、新疆、西藏、吉林等地进行引种，以期开发出功能更全面的保健产品。目前，关于玛咖的化学成分和生物活性研究已有报道，成分研究表明玛咖主要有生物碱、芥子油苷、异硫氰酸酯、玛咖酰胺、玛咖烯、甾醇等次生代谢产物，生物活性研究大多以其粗提取物的形式为主，但对玛咖中某单一组份所对应的生物活性尚缺乏系统研究。为了更好地研究玛咖药理作用的机理，为了进一步阐明其有效成分，加强玛咖药材资源的开发利用与质量控制，本文对鹤庆产玛咖乙醇提取物的化学成分进行系统研究，并利用高效液相色谱（HPLC)对16批不同产地、色型的玛咖进行HPLC特征指纹图谱研究。
　　目的：通过对鹤庆产玛咖乙醇提取物的化学成分展开系统的研究，进一步明确其药效物质基础，寻找新的活性成分资源，深入开展对玛咖的专属性对照物质的研究。同时利用HPLC技术对国内不同产地、色型的玛咖进行指纹图谱研究，为玛咖的质量标准控制提供可行的实验依据。
　　方法：⑴采用MCI大孔吸附树脂、正相硅胶色谱、反相硅胶色谱、SephadexLH-20色谱、半制备HPLC柱色谱以及重结晶等方法，对鹤庆产玛咖的石油醚萃取部位和正丁醇萃取部位进行分离纯化，并根据理化性质、光谱数据分析（UV、IR、1D,2D-NMR、MS)、高效液相色谱法等方法，分别鉴定所纯化的单体化合物。⑵对收集自全国各地的16批次玛咖进行HPLC指纹图谱研究，优化了色谱条件为：Shimadzu LC-20AD型高效液相色谱仪，紫外检测器，Inertsil C18柱（5μm，4.6×150 mm），流动相A：0.5％磷酸水溶液，流动相B：乙腈，采用二元梯度洗脱程序；流速：1.0 mL?min-1；检测波长220 nm；柱温30℃；进样量10μL。
　　结果：①共分离得到18个化合物，分别鉴定为：macaolidine(1)，色氨酸(2)，胡萝卜苷(3)，(3S)-1,2,3,4-四氢-β-卡波林-3-羧酸(4)，绿原酸(5)，木犀草素(6)，金丝桃苷(7)，芹菜素(8)，棕榈酸(9)，琥珀酸(10)，β-谷甾醇(11)，N-苄基十七碳酰胺(12)，N-(3-甲氧基-苄基)-十六碳酰胺(13)，十六烷酸环氧乙烷基甲酯(14)，苯甲胺(15)，monasfluore B(16)，macaridine(17)，对二甲氨基苯甲酸(18)。②16批次玛咖药材共标定了13个共有指纹特征峰，对特征指纹图谱进行相似度计算和聚类分析，结果显示16批样品的相似度均在0.9以上，最高相似度达到0.998。其方法学考察结果和指纹图谱评价结果，均符合国家中药指纹图谱的标准，说明本试验建立的玛咖药材HPLC指纹图谱共有模式能比较真实全面的反映反应玛咖的特征。
　　结论：⑴在天然产物中分离得到的酰胺类生物碱，化合物4、14、16为从玛咖中分离得到的化合物。⑵通过单因素考察对玛咖药材的提取工艺进行优化，确定了最佳色谱条件，构建了16批玛咖药材的HPLC指纹图谱，相似度分析与聚类分析结果一致表明16批玛咖药材之间具有较高的一致性，证明本实验建立的玛咖HPLC指纹图谱可可以作为科学评价不同产地玛咖及其产品质量的检测方法。

目录

声明

前言

第1章 鹤庆产玛咖化学成分研究

1.1 仪器与试剂

1.2 实验方法

1.3 结构鉴定

1.4 实验讨论

第2章 玛咖药材HPLC指纹图谱的建立

2.1 实验材料和仪器

2.2 HPLC指纹图谱分析方法的建立

2.3 玛咖药材HPLC指纹图谱的建立

2.4 聚类分析

2.5 实验讨论

全文总结

创新点及意义

思考与展望

参考文献

综述:独行菜属中药化学成分和药理作用研究进展

致谢

硕士学位期间科研工作汇报

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