白杨素活化p53/Bcl-2/caspase-9信号通路促进肝癌细胞凋亡的研究

摘要

【目的】 （1）明确白杨素是否抑制肝癌细胞的增殖或增强肝癌细胞凋亡； （2）探讨白杨素引起肝癌细胞凋亡的机制； （3）为白杨素真正成为应用于临床的抗肿瘤药物提供理论依据。 【方法】 用不同浓度的白杨素处理肝癌细胞系HepG2、QGY7701细胞24小时后： 1.应用倒置显微镜观察肝癌细胞的形态学变化； 2.采用MTT实验方法检测受不同浓度的白杨素处理后的肝癌细胞的增殖能力； 3.采用流式细胞术分析不同浓度的白杨素处理后的肝癌细胞的凋亡的情况； 4.通过western blotting技术检测肝癌细胞HepG2、QGY7701中P53、Bcl-2、bax,bak、bad、caspase3、caspase9等蛋白表达水平的影响。 【结果】 1.显微镜下白杨素明显抑制了肝癌细胞HepG2、QGY7701的增殖并促进肝癌细胞的凋亡，加药组与对照组相比死亡细胞数量大幅增加，细胞的异型性更加显著； 2. MTT实验表明：白杨素能显著地抑制肝癌细胞HepG2、QGY7701的增值，并且药物对肝癌细胞的抑制率随药物浓度升高而增强； 3.流式细胞术表明白杨素能促进肝癌细胞HepG2、QGY7701的凋亡； 4.western blotting提示：在肝癌细胞中白杨素能增强肝癌细胞HepG2、QGY7701中促癌基因P53、Bcl-2、bax,bak、bad、caspase3、caspase9的表达，引起细胞的凋亡。 【结论】 （1）白杨素增强肝癌细胞凋亡作用，且凋亡率呈药物剂量依赖性； （2）白杨素通过影响P53、Bcl-2、caspase9等蛋白的表达水平从而引起肝癌细胞发生凋亡。 （3）找到了白杨素作为一种高效、低毒、价廉、患者容易耐受的抗肿瘤药物的理论依据。