过钒酸钠抑制辐射诱导造血细胞凋亡作用机制的研究

摘要

该研究应用MTT法、HE染色、TUNEL法染色、电子显微镜等形态学观察、Annexin-V标记、流式细胞仪检测等方法,观察了酪氨酸磷酸酶酶抑制剂过钒酸钠对受照后造血细胞对造血细胞因子的增殖反应性变化、细胞周期改变、细胞凋亡形成的基本规律及其影响;对信号分子抑制剂或激动剂以及电离辐射对细胞线粒体膜电位改变的影响进行了初步探索;并对过钒酸钠对辐射后造血细胞细胞凋亡相关因子Caspases、Bcl-2家族等进行了检测. 结果表明,造血细胞受照后对造血因子增殖反应性降低,细胞出现G<,2>/M期阻滞和典型的细胞凋亡,上述改变具有较好的时间效应和剂量效应.过钒酸钠能特异地促进受照造血细胞的增殖、存活,增加和延长受照细胞的G<,2>/M期阻滞,促进受损细胞的修复,显著降低辐射诱导的细胞凋亡.过钒酸钠对受照后造血细胞上述改变的影响是通过抑制细胞酪氨酸磷酸酶,增强细胞酪氨酸磷酸化发挥作用的.蛋白质酪氨酸磷酸化的降低是电离辐射后造血细胞增殖抑制和细胞凋亡的主要原因之一,早期过钒酸钠的应用可逆转这一过程,增加受照后造血细胞cyclinB1表达,使受照细胞G<,2>/M期阻滞增加和时间延长;并使受照后造血细胞Bcl-2表达增加,减少细胞色素C等凋亡诱导因子的释放,增强细胞因子信号转导,阻断多条死亡信号通路的激活,抑制Caspases的活化,拮抗辐射诱导的细胞凋亡.同时能解除电离辐射对MAPK/ERK、PI3K、JAK/STAT等生存信号的抑制,促进受照后造血细胞的存活、增殖.

目录

英文缩写

前 言

第一部分过钒酸钠对辐射前后造血细胞生物学特性影响的研究

1.材料与方法

2结果

2.1过钒酸钠对HL-60细胞生物学特性影响的研究

2.2过钒酸钠对CEM细胞生物学特性影响的研究

2.3过钒酸钠对NFS-60细胞生物学特性影响的研究

2.4过钒酸钠对BET-2细胞生物学特性影响的研究

3.讨论

参考文献

第二部分过钒酸钠对辐射后造血细胞细胞周期改变影响的研究

1.材料与方法

2.结果

2.1过钒酸钠对辐射后HL-60细胞细胞周期改变的影响

2.4过钒酸钠对辐射后BET-2细胞细胞周期改变的影响

2.5不同时刻加入Per细胞细胞周期改 变的影响

3.讨论

参考文献

第三部分过钒酸钠对辐射后BET-2细胞细胞凋亡影响的研究

1.材料与方法

2.结果

2.1台盼蓝染色观察

2.2 HE染色光镜下形态学观察

2.3电镜观察

2.4 TUNEL法检测

2.5 Annexin V法检测

3.讨论

参考文献

第四部分过钒酸钠对电离辐射后BET-2细胞线粒体膜电位改变的影响研究

1.材料与方法

2.结果

2.7Per对无EPO所致BET-2细胞MMP改变的影响

3.讨论

参考文献

第五部分过钒酸钠对BET-2细胞细胞凋亡相关因子影响的研究

1.材料与方法

2.结果

2.1Per对辐射后BET-2细胞cyclinB1改变的影响

2.2Per对辐射后BET-2细胞Bcl-2-Bax改变的影响

2.3Per对辐射后BET-2细胞Caspases改变的影响

3.讨论

参考文献

小结

致谢

综述辐射诱导细胞凋亡的信号传导

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