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嗅球成鞘细胞和几丁质植入治疗大鼠坐骨神经损伤的实验研究

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前言

第一部分大鼠嗅球成鞘细胞的分离、培养与鉴定

材料及方法

实验结果

讨论

小结

第二部分嗅球成鞘细胞和几丁质在大鼠坐骨神经损伤后对神经元的保护及功能恢复中的作用

材料和方法

实验结果

讨论

小结

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参考文献

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摘要

该实验分离新生大鼠嗅球成鞘细胞(Olfactory Ensheathing Cells,OECs)进行原代培养,阿糖胞苷(arabinosyl cytosine,Ara-c)进行纯化,再用神经生长因子受体(nerve growth factor receptor p75,p75NGFR)和胶质纤维酸性蛋白(glial fiber acidic protein,GFAP)抗体进行免疫组化鉴定.建立坐骨神经离断模型,硅胶管套接神经断端,管内局部植入培养的OECs细胞悬液和几丁质(chitin)溶液,并与SAL进行对照.结果表明,OECs和几丁质能减少损伤侧脊髓运动神经元的死亡率,降低脊髓运动神经元中ChE、ACP酶活性变化的幅度,并有利于新生神经纤维髓鞘的形成,促进损伤神经电传导功能、神经元胞体逆行轴浆运输、坐骨神经功能指数等的恢复.因此,OECs和几丁质对外周神经损伤所导致的脊髓神经元死亡和退行性变有较好的保护作用,对外周神经损伤后新生神经功能的恢复具有积极的促进作用.此外,在OECs的培养中,该实验发现直接挤压法操作较为简单、易行、省时、不需要特殊仪器设备.利用直接挤压法分离、培养的OECs产量较高,经形态学及免疫组化鉴定与国外报道一致.因此,直接挤压法是一种分离、培养OECs较为有效的方法.

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