中药清胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠各器官的保护作用及机制的初步研究

摘要

目的：应用中药新药清胰颗粒(qingyi grains，QYG)对重症急性胰腺炎(severeacute pancreatitis，SAP)大鼠进行治疗，观察模型动物血清淀粉酶变化，对胰腺、肺、肠、肝、肾等组织进行病理组织学检查，观察其治疗效果；观察模型动物血清过氧化物岐化酶(superoxide dismutase，SOD)和丙二醛(malondialdenhyde，MDA)等氧化应激因子变化；观察模型动物各器官核因子κB(NF-κB)和高迁移率族蛋白1(HMGB1)的变化，探讨中药新药清胰颗粒的可能的治疗机制，为日后投入临床使用提供实验依据。
　　 方法：根据随机对照试验将Sprague-Dawley大鼠分为：假手术组(sham-operation group，sham)，SAP组，QYG组，每组18只，各组又分别随机分为24h、48h、72h 三组，每组6只。采用逆行胰胆管内注射5[％]牛磺胆酸钠(sodiumtaurocholate，STC)(0.1ml/100g)制备大鼠SAP模型。QYG组于造模后立即给予清胰颗粒溶液(1ml/100g)灌胃治疗，之后每12h 重复给药一次，sham组仅予开腹后翻动胰腺，不予胰胆管注射。各组动物于相应时间点处死收集血液和各器官组织，人工碘比色法测定血清淀粉酶，羟胺比色法测定血清总SOD含量，硫代巴比妥酸(TBA)比色法检测血清MDA 含量，HE 染色观察胰腺、肺、小肠、肝、肾等组织病理，S-P免疫组化法观察胰腺、肺、小肠、肝、肾等组织NF-κBp65以及HMGB1 表达变化。
　　 结果
　　 1.血清淀粉酶变化SAP组与QYG组血清淀粉酶水平明显高于sham组；与SAP组比较，QYG组于24h和48h血清淀粉酶明显降低(t=7.929，P=0.000；t=9.847，P=0.000)，而与QYG 治疗后72h 无统计学差异(t=0.769，P=0.460)。
　　 2.血清SOD和MDA 含量变化SAP组与QYG组各时间点的血清总SOD 含量均明显低于sham组。于QYG 治疗后48h和72h，QYG组血清SOD 较SAP组明显升高(t=-5.483，P=0.000；t=-4.519，P=0.001)，而于治疗后24h 无统计学差异(t=-0.747，P=0.472)。SAP组与QYG组各时间点的血清MDA 含量均明显高于sham组。于QYG 治疗后24h、48h和72h，血清MDA 含量均较SAP组明显降低(t=7.128，P=0.000；t=4.544，P=0.001；t=5.501，P=0.001)。
　　 3.各器官的病理组织学变化SAP大鼠胰腺、肺、小肠、肝、肾等组织出现了不同程度的损伤。应用QYG治疗后的大鼠各器官的病理组织学损伤程度较SAP组有所改善。
　　 4.各器官NF-κBp65 Bp65、HMGB1 表达变化SAP大鼠胰腺、肺、小肠、肝、肾等组织NF-κBp65、HMGB1 表达增加，应用QYG 治疗可不同程度的减少NF-κBp65、HMGB1 表达。
　　 结论
　　 1.SAP大鼠血清淀粉酶明显升高，清胰颗粒可以降低急性胰腺炎大鼠高血清淀粉酶血症。
　　 2.SAP大鼠胰腺、肺、小肠、肝、肾等器官出现了不同程度的损伤。应用清胰颗粒治疗后的大鼠，各器官的损伤程度较SAP组改善。中药新药清胰颗粒对急性胰腺炎大鼠的多器官损伤有保护作用。
　　 3.SAP时大鼠机体抗氧化能力减弱，产生大量氧自由基，应用清胰颗粒治疗可提高机体清除氧自由基的能力，降低氧化应激因子的水平。抗氧化作用可能是清胰颗粒治疗急性胰腺炎的可能机制之一。
　　 4.SAP大鼠胰腺、肺、小肠、肝、肾等器官NF-κBp65、HMGB1 表达增加，应用清胰颗粒治疗后，大鼠各器官NF-κBp65、HMGB1 表达不同程度的减少。
　　 清胰颗粒可通过抑制各器官NF-κBp65、HMGB1 表达，从而发挥其器官保护作用。