人胎胰岛细胞培养与凋亡相关因子检测及意义

摘要

该课题在人胎胰岛细胞培养的基础上,检测不同生长时期胰岛及成纤维细胞TGF-β、P21ras、c-fos的表达,以期探讨其与胰岛细胞凋亡的关系.结论:⒈实验采用胶原酶消化法进行胰岛细胞消化,胰岛细胞同组织块联合培养、转皿及消化时间差法纯化.DTZ染色证明上述胰岛分离、纯化方法较成功,且细胞至15天仍具有良好生物活性,可能与实验采用胰岛细胞同组织块联合培养方法有关,也可能是实验采用消化及纯化方法最大限度减少胰岛细胞损伤有关.胰岛细胞分离及培养方法的成功为临床应用及进一步研究打下基础.⒉P21ras在成纤维细胞指数生长期高表达,提示在细胞正常生长过程中,Ras可刺激成纤维细胞生长,可能与成纤维细胞低凋亡率、细胞可传代数多相关.而在胰岛细胞各生长时期弱表达,无明显变化,可能是Ras诱导凋亡通路未被过度激活,不发挥诱导细胞凋亡的作用.⒊流式细胞仪检测胰岛细胞周期多位于G1期,这和胰岛TGF-β蛋白表达的免疫组化检测结果一致.TGF-β<,1>可能是通过将胰岛细胞阻滞在G1期从而导致细胞凋亡.⒋在胰岛细胞及成纤维细胞凋亡前均可观察到c-fos的表达,认为c-fos的表达可能是细胞凋亡的共同环节,并无细胞特异性,而且c-fos蛋白的表达对凋亡的启动可能是必须的,直接影响着细胞的生死存亡.

目录

英文缩写一览表

前 言

第一部分人胎胰岛细胞分离、培养

材料与方法

结果

讨论

第二部分凋亡相关因子检测

材料与方法

结果

讨论

小 结

致 谢

照 片

参考文献

文献综述一胰岛移植研究现状及展望

一、同种异体移植

二、异种移植

三、胰岛干细胞移植

四、转基因技术在胰岛移植中的应用

参考文献

文献综述二TGF-β、Ras、c-fos与细胞凋亡

一、TGF-β与细胞凋亡

二、Ras与细胞凋亡

三、c-fos与细胞凋亡

参考文献

研究生期间撰写的论文及参编著作目录