人羊膜匀浆上清液治疗兔角膜碱烧伤的实验研究

摘要

目的：观察人羊膜匀浆上清液对兔角膜上皮细胞的生长和增殖的影响，观察人羊膜匀浆上清液促进兔角膜碱烧伤后角膜上皮和基质修复的作用，为临床上用人羊膜匀浆上清液点眼治疗眼碱烧伤提供理论依据。 方法： 1.体外实验：将兔角膜上皮细胞离体培养，用MTT比色法观察羊膜匀浆上清液在不同浓度(培养液中羊膜匀浆蛋白含量分别为40、80、160μg/ml)条件下和不同时相点(24、48、96h)时对兔角膜上皮细胞培养增殖的影响。 2.动物活体实验：先取8只(16眼)家兔随机分为4组：生理盐水对照组、1：1羊膜匀浆组、1：2羊膜匀浆组、1：3羊膜匀浆组。每组2只兔子4只眼，碱烧伤后每天行荧光素染色并在裂隙灯下观察角膜上皮愈合情况，每组在术后第1天、第3天、第7天照相，根据角膜上皮愈合情况最后选择1：2羊膜匀浆组为实验组。然后取15只家兔(30只眼)分为3组：对照组(生理盐水点眼)、羊膜匀浆组(1：2羊膜匀浆点眼)、bFGF组(贝复舒眼液点眼)，碱烧伤后每天行荧光素染色并在裂隙灯下观察角膜上皮愈合情况，每组在术后第1天、第3天、第5天、第7天和第14天照相观察角膜上皮愈合率和新生血管生长面积率情况，第1天、第3天、第7天、第14天取材观察胶原纤维排列、成纤维细胞数量。 结果： 1.角膜上皮细胞增殖检测：随着时间的延长(24、48、96小时)，角膜上皮细胞增殖相差显著(P＜0.05)，随着羊膜匀浆上清液浓度增高(40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)，角膜上皮细胞增殖相差显著(P＜0.05)。 2.角膜上皮愈合率：兔角膜碱烧伤后第1天和第3天，羊膜匀浆组与bFGF组、对照组相比，差异显著(P＜0.05)，bFGF组和对照组间无显著差异(P＞0.05)。第5天、第7天，羊膜匀浆组、bFGF组和对照组间相比差异非常显著(P＜0.01)，而羊膜匀浆组和bFGF组间无显著差异(P＞0.05)。 3.角膜新生血管面积率：碱烧伤后第7天和第14天，各组间新生血管面积率均无显著差异(P＞0.05)。 4.AgNOs染色成纤维细胞计数：对染色切片行成纤维细胞计数(每张切片随机选3个视野，×1000)，每组3张切片，取其平均数行统计学处理，碱烧伤后第7天羊膜匀浆组与对照组比相差显著(P＜0.05)，bFGF组与对照组比相差非常显著(P＜0.01)。14天时各组间均无显著差异(P＞0.05)。 结论： 1.羊膜匀浆上清液有明显促进兔角膜上皮细胞增殖的作用，且呈剂量依赖性。 2.羊膜匀浆上清液能促进兔角膜碱烧伤后角膜上皮愈合，早期应用即能发挥作用。 3.羊膜匀浆上清液能促进兔角膜碱烧伤后角膜基质有序修复。 4.羊膜匀浆上清液对兔角膜碱烧伤后角膜新生血管生长无明显促进或抑制作用。

目录

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英文缩写一览表

前 言

第一部分人羊膜匀浆上清液对兔角膜上皮细胞增殖的影响

材料与方法

结 果

第二部分羊膜匀浆上清液点眼治疗兔角膜碱烧伤的实验研究

材料与方法

结果

讨论

小结

致谢

照片1

照片2

照片3

照片4

参考文献

文献综述羊膜在治疗眼表疾病中的作用

一羊膜

二羊膜手术

三术后护理

四机制

五羊膜移植适应症

六移植羊膜溶解

七羊膜移植的有限性

八羊膜移植和眼部感染

九羊膜未来的发展方向

参考文献

研究生期间发表的文章