壳聚糖及相关产物降脂活性和机制研究

摘要

高脂血症是一种严重危害人类健康的全身脂质代谢异常疾病，是心脑血管疾病的重要危险因素，随着现代饮食和生活方式的转变，高脂血症已经成为全球性公共卫生问题。目前以化学药物治疗为主，但存在多种严重不良反应。开发安全、有效、不良反应少的天然降血脂药物意义重大。
　　壳聚糖（CTS）是从虾蟹壳中提取出的带正电荷的碱性多糖，具有良好的生物相容性和生物可降解性，大量体内外实验证明壳聚糖具有良好的降脂和减肥活性。但其水溶性差需大剂量服用，易产生恶心、呕吐和便秘等副作用。课题组成员前期将其制备成分散性好、利用度高的壳聚糖微球（CTMS）以及载辣椒碱的壳聚糖微球（CCMS），达到了增强活性和降低副作用的目的。壳寡糖（COSⅡ和COSⅠ）和氨基葡萄糖（GLC）是壳聚糖的降解产物，水溶性高、易吸收且无毒副作用。
　　本实验研究CTS及相关产物对油酸诱导的HepG2细胞内脂质堆积的作用，MTT法确定安全给药浓度范围，油红O染色后观察细胞形态和脂滴分布，提取油红O定量脂质含量，测定细胞内TG含量。结果表明，CTS、CTMS、CCMS、COSⅡ、COSⅠ和GLC均可有效抑制HepG2细胞内的脂质堆积，显著降低细胞内TG含量，呈剂量依赖性。
　　采用高脂饮食诱导高脂血症大鼠模型，研究CTS及降解产物的降脂药效活性。结果表明，CTS、COSⅡ和GLC可不同程度的减缓高脂血症大鼠的体重、脂体比、Lee's指数、脏器指数的增长，抑制脂肪细胞的生长，具有一定的减肥活性，呈剂量依赖性；可显著降低血清TC、TG和LDL-C含量；减少肝脏中TC和TG含量、增加总胆汁酸（TBA）含量，促进粪便中TC、TG和 TBA的排泄，发挥降脂作用。COSⅡ、GLC可不同程度的提高高脂血症大鼠SOD酶活性，具有抗氧化作用。CTS、COSⅡ和GLC可显著降低高脂血症大鼠血清和肝脏中AST、ALT的含量，不同程度地缓解脂肪肝症状，具有保肝护肝作用。
　　为进一步研究CTS及相关物质降脂活性的作用机理，通过Western Blot技术检测其对HepG2细胞内脂质代谢相关的肝脂酶（HL）和过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）的蛋白表达。结果显示，CTMS可促进 HepG2细胞内 HL蛋白和 PPARα蛋白的表达，而CTS、CCMS、COSⅡ、COSⅠ和GLC对其表达基本无影响；抑制PPARα基因表达，可显著抑制HL蛋白表达，表明CTMS促进HL蛋白表达与PPARα基因有关；在高TC、TG条件下，CTMS干预后对HL蛋白和PPARα蛋白表达均有促进作用，抑制PPARα基因后，上述作用消失，说明CTMS促进HL蛋白表达影响可能是先通过促进PPARα表达实现。

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第一章 序言

1.1 高脂血症

1.2 高脂血症的治疗

1.3 壳聚糖及相关产物在高脂血症方面的应用

1.4 降脂分子机制的研究进展

1.5 展望

1.6 本课题的提出

第二章 壳聚糖及相关产物对HepG2细胞脂质堆积作用的影响

2.1 前言

2.2 材料

2.3 方法

2.4 结果与讨论

2.5 本章小结

第三章 壳聚糖及降解产物对饮食高脂血症大鼠降脂活性研究

3.1 前言

3.2 材料

3.3 方法

3.4 结果与讨论

3.5 本章小结

第四章 壳聚糖及相关产物对HepG2细胞HL、PPARα蛋白表达的影响

4.1 前言

4.2 材料

4.3 方法

4.4 结果与讨论

4.5 本章小结

全文总结及研究展望

参考文献

攻读学位期间参与发表的论文及申请的专利

致谢