纳米细菌感染与Ⅲ型前列腺炎的关系研究

摘要

背景及目的：慢性前列腺炎是泌尿科的临床常见病，约占门诊患者数的8％。根据NIH的最新分类，Ⅲ型前列腺炎(ⅢA-inflammatoryCPPSandⅢB-noninflammatoryCPPS，NIHClassificationSystemforProstatitis，1998)在临床最为常见，占前列腺炎的60％以上。该病的病因至今仍不清楚，其诊治已成为国际泌尿界的难题。在临床实践中，我们注意到Ⅲ型前列腺炎的某些临床特征无法用现有的病因学理论解释。例如，(1)虽然常规检查及培养无菌，但前列腺确实存在炎症或炎症标记物阳性；(2)前列腺中经常发现结石或钙化；(3)抗生素治疗能够取得一定效果。这些特点提示我们可能有不被认知的感染性病因存在。 Nanobacteria的发现及其致病特点为阐明Ⅲ型前列腺炎的病因提供了全新的切入点。纳米细菌是芬兰科学家Kajander在进行细胞培养时发现，直径约50～500nm，革兰阴性，呈球状或球杆状，细胞壁厚，无荚膜与鞭毛。纳米细菌在普通的微生物培养条件下不能生长繁殖，需要在细胞培养条件下才能生长。 纳米细菌能感染人体多种组织器官，释放毒素引起组织炎症。纳米细菌具有独特的生物矿化现象，能产生坚硬的矿化外壳覆盖于菌体周围，导致被感染组织发生病理性钙化。现已研究发现，纳米细菌感染与肾结石、多囊肾、动脉粥样硬化等疾病密切相关。体内感染的纳米细菌主要经泌尿系统排出，故其可随尿液返流进入前列腺腺管，引起前列腺的炎症。 本课题针对纳米细菌感染与Ⅲ型前列腺炎的关系进行系统研究，以期为阐明Ⅲ型前列腺炎的病因找到新的线索和依据，并为该病的临床诊疗提供新的思路。 方法： 第一部分：对CPPS患者(n=48)和健康男性(n=48)的VB1，VB2，EPS，VB3分别进行纳米细菌分离培养，采用单克隆抗体间接免疫荧光染色(IIFS)、激光共聚焦显微镜(CLSM)和透射电镜(TEM)鉴定纳米细菌，以验证Ⅲ型前列腺炎患者前列腺中是否存在纳米细菌感染，并比较CPPS患者阳性率与健康男性阳性率的差异。 第二部分：将上述CPPS患者随机分为两组：anti-NB组(n=24)和对照组(n=24)，分别给予抗纳米细菌治疗与安慰剂治疗，比较治疗前后EPS纳米细菌培养阳性率及患者症状程度(NIH-CPSI)的差异，评价抗纳米细菌治疗对Ⅲ型前列腺炎的疗效。 第三部分：采用ELISA检测CPPS患者(n=20)和健康男性(n=20)EPS中炎性因子TNF-α和IL-6水平，比较两组间的差异。从外周血中分离培养单核细胞(PBMC)，用培养的纳米细菌刺激PBMC，用ELISA检测TNF-α和IL-6水平的变化，从而在细胞水平探讨纳米细菌致Ⅲ型前列腺炎的分子机制。 结果：主要研究结果如下： 1.CPPS组和对照组的VB1、VB2经培养均未发现纳米细菌。 2.CPPS组的EPS和VB3中纳米细菌阳性率分别为58.3％和10.4％，而对照组EPS和VB3中阳性率分别为4.2％和2.1％，两组间差异显著(P＜0.01)。 3.IIFS-CLSM观察发现纳米细菌大小不等，聚集成簇，并且呈聚集的趋势。TEM观察发现纳米细菌呈球状或球棒状，直径100～500nm，聚集成簇，菌体覆盖黑色被膜，周围有结晶体形成。 4.Anti-NB组纳米细菌培养阳性率治疗后较治疗前显著降低(P＜0.01)，而对照组治疗前后无明显差异(P＞0.05)。 5.Anti-NB组患者症状(NIH-CPSI)治疗后较治疗前显著减轻(P＜0.01)，而对照组治疗前后无明显差异(P＞0.05)。 6.CPPS组EPS的IL-6、TNF-α水平均明显高于对照组(P＜0.01)。 7.NB刺激PBMC后，TNF-α、IL-6水平显著高于对照(P＜0.01)。 结论： 1.Ⅲ型前列腺炎患者前列腺中存在纳米细菌感染，并且感染率显著高于健康男性。 2.四环素作为抗纳米细菌的首选药，对改善CPPS患者的症状，并抑制前列腺中的纳米细菌有显著的疗效。 3.Ⅲ型前列腺炎患者前列腺中炎性因子水平显著升高，这种炎性改变可能是由于纳米细菌感染前列腺所导致的局部炎症反应。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写词表

声明

前 言

第一部分 Ⅲ型前列腺炎患者前列腺是否存在纳米细菌感染的实验研究

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

第二部分 抗纳米细菌治疗前后纳米细菌培养阳性率及患者症状程度的比较研究

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

第三部分 纳米细菌刺激炎性细胞因子表达的研究

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

全文结论

致谢

照 片

参考文献

文献综述：纳米细菌的研究现状

研究生期间发表的文章