骨桥蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

摘要

骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是首先由Senger于1979年作为一种与恶性转化有关的磷酸化糖蛋白提取的，是骨骼和牙齿矿化细胞外基质的主要组成成分。它广泛分布于人体组织中且具有多种功能，它在T淋巴细胞、上皮细胞、骨细胞、巨嗜细胞、内皮细胞及肿瘤细胞中都有较高表达；在骨组织的矿化与重建、动脉硬化、抗感染、免疫调节、缺血再灌注损伤等过程中发挥重要的作用。近年来，OPN与肿瘤的发生发展，特别是它与肿瘤转移的关系日益引起人们的关注。大量研究表明，多种肿瘤细胞在体内、外均能产生OPN，在不同的恶性肿瘤转移形成过程中发挥重要作用。近来的资料显示，在部分肿瘤病人的血清中也以较高水平存在，在有转移能力的肿瘤组织中其表达更高，故有人将OPN称为“肿瘤相关基因”或“转移基因”。目前，对OPN在膀胱移行细胞癌(BTCC)中表达情况了解尚少。本研究拟探讨不同病理分级、临床分期的膀胱移行细胞癌组织中OPN的表达情况，并结合患者生存资料，对OPN表达与膀胱移行细胞癌预后进行分析研究，为OPN对膀胱移行细胞癌的预后判断及治疗靶点的选择提供实验依据。实验方法和结果总结如下： 1.HE染色筛选标本：(1)、确定正常组织标本无炎症、癌变等病理改变；(2)、结合临床资料根据WHO及UICC-TNM标准对肿瘤组织分别进行分级和分期。 2.通过免疫组化SP法观察正常膀胱组织及膀胱移行细胞癌中OPN的表达情况。每批染色均设立以用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照，用已知的OPN染色阳性的成骨肉瘤组织切片做阳性对照。OPN定位于细胞浆，阳性染色指显微镜下观察细胞内具有清晰可见的、定位准确的黄色颗粒，而且背景清晰。发现在12例正常膀胱组织中，11例(96.7％)为阴性，1例(3.3％)为弱阳性；45例膀胱移行细胞癌中21例(46.7％)为强阳性，14例(31.1％)为中等阳性，7例(15.5％)为弱阳性，3例(6.7％)为阴性。 3.通过门诊复查、书信或电话方式对1995年1月-2000年1月期间就诊大坪医院病理诊断为膀胱移行细胞癌的患者进行随访。生存期白手术当日开始，到2007年1月止。生存期计算以月为单位，未满整月则大于或等于15天计一月，小于15天则不计，随访期限为12～84月。45例膀胱移行细胞癌患者全部进行随访，随访率100.00％。5年内死亡人数11例，其中OPN高表达者10例。 4.统计学分析：数据用SPSS11.0统计软件包进行统计学分析处理。OPN在膀胱肿瘤组织与正常膀胱组织中表达强度的差异用频数表等级资料两样本秩和检验；OPN高表达率与肿瘤临床分期间比较用X2检验；病理三分级的OPN高表达率的趋势性检验用cochran趋势性X2检验；OPN高表达率与肿瘤复发、转移间比较用频数表等级资料两样本秩和检验。随访资料生存分析采用Kaplan-meier曲线分析法，用Log-rank检验判断差异性。以P＜0.05为显著差异，P＜0.01为非常显著差异。OPN在膀胱移行细胞癌中的表达与正常膀胱组织相比，具有非常显著的差异(P＜0.01)；随病理分级的增加表达增强(P＜0.01)；随临床分期增加表达增强(P＜0.05)。复发膀胱移行细胞癌OPN的高表达率明显高于初发膀胱移行细胞癌OPN的高表达率(P＜0.01)。发生远处转移的膀胱移行细胞癌OPN的高表达率明显高于未发生远处转移的膀胱移行细胞癌OPN的高表达率(P＜0.01)。Kaplan-meier曲线分析OPN高表达组患者2、3、5年生存率分别为97.14％、91.43％、71.43％，OPN低表达组患者2、3、5年生存率分别为100.00％、100.00％、90.00％。Log-rank检验显示：膀胱移行细胞癌患者中OPN高表达组术后生存率低于OPN低表达组(差异分别为P＜0.05，P＜0.05和P＜0.01)。 结论：OPN是膀胱移行细胞癌细胞中具有相对特异性表达的蛋白，OPN表达强度同肿瘤分级、分期、复发、转移、5年生存率有密切关系，其表达增强可能与多种致瘤因素共同参与了膀胱移行细胞癌的发生、发展有关；OPN表达可作为预测膀胱移行细胞癌生物行为及预后的指标，也有望成为靶点治疗膀胱移行细胞癌的有效途径之一。

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文献综述骨桥蛋白与肿瘤的转移

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