c-Jun与乳腺癌侵袭转移相关性的实验研究

摘要

c-Jun是转录因子的亮氨酸拉链蛋白家族成员之一，位于人类染色体1Y31232，全长3.5kb，无内含子，编码的核蛋白JUN的分子量为39kDa，由334个氨基酸组成。c-Jun在乳腺癌的发生过程中起重要作用。本研究通过体内外实验研究了c-Jun对乳腺癌细胞表型及在裸鼠体内肿瘤源性和转移性的影响。证明c-Jun在乳腺癌的发生、发展和转移过程中起决定性作用。 1.采用RT-PCR的方法从MCF-7细胞中钓取了c-Jun全长基因。并将获得的c-Jun基因插入载体pcDNA3.1，构建了表达载体pcDNA3.1/c-Jun。为下一步的研究奠定了基础。 2.c-Jun/Ap-1与乳腺癌的侵袭性有关。但是，迄今为止c-Jun在乳腺癌体内侵袭转移中的作用还不清楚。我们将c-Jun基因转染具有弱侵袭性的MCF-7细胞和无肿瘤源性的SKBR3细胞，并经筛选获得稳定高表达c-Jun的细胞克隆。通过体外实验研究c-Jun对乳腺癌细胞细胞表型的影响。c-Jun过表达可促进MCF-7细胞的增殖，使处于S期和G2/M期细胞比例增加，同时细胞的移动性和侵袭性明显增加。这些结果进一步提供了c-Jun参与乳腺癌转移的证据。 3.为研究c-Jun在乳腺癌体内侵袭和转移过程中的作用。我们将MCF-7/c-Jun和SKBR3/c-Jun细胞经尾静脉或皮下接种裸鼠。实验结束时，取得原发肿瘤和实验动物的肝脏，将含有转移灶的肝脏组织进行组织学检测和免疫组化的检测。我们发现在MCF-7细胞中过表达c-Jun可使原本是弱侵袭性的：MCF-7细胞，在裸鼠肝脏部位形成转移灶。在SKBR3细胞中过表达c-Jun可使原本无肿瘤源性的SKBR3细胞获得肿瘤源性，并可在裸鼠肝脏形成转移灶。并且与其母本细胞相比，SKBR3/c-Jun和MCF-7/c-Jun细胞的一组与转移相关的基因有转录上调的趋势。这表明c-Jun在乳腺癌的发生、发展和转移过程中起决定性作用。同时还提示c-Jun可能是乳腺癌治疗的重要靶点。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写一览表

声明

前 言

第一部分c-Jun基因的克隆及表达载体的构建

材料和方法

结 果

讨 论

小 结

第二部分c-Jun过表达对人类乳腺癌细胞系转移表型的影响

材料和方法

结 果

讨论

小 结

第三部分c-Jun过表达在乳腺癌细胞肿瘤发生及体内转移中的作用

材料和方法

结 果

讨论

小 结

全文结论

全文创新之处

参考文献

致 谢

文献综述 一个有关肿瘤侵袭转移的新概念——转移的肿瘤干细胞

在读硕士期间发表的文章