兔胆囊切除术后Oddi括约肌离体收缩、肌球蛋白重链表达及超微结构的变化

摘要

Oddi括约肌功能障碍综合征(sphincter of Oddi dysfunction，SOD)是由Oddi括约肌(sphincter of Oddi，SO)功能异常所导致的一组以反复发作性上腹痛、黄疸、肝功能异常、淀粉酶升高等为主要表现的临床综合症。该病多发生于胆囊切除术后的患者，因此又称为胆囊切除术后综合征( post-cholecystectomy syndrome，PCS)。目前的研究证实，胆囊的张力和正常的舒缩运动对于SO的运动有着明显的调节作用，它们之间存在着神经反射。胆囊切除术后患者的餐后CCK峰对SO的抑制作用消失，表明胆囊的存在与否在体液水平上对SO的运动也起着重要的调节作用。因此，胆囊切除后由于神经和体液的调节异常所导致的SO运动功能的改变可能是胆囊切除术后患者发生SOD的始动因素之一。目前国内外的研究多集中于SOD发生的调节因素和钙离子信号通路方面，而对于SO本身的病理变化研究甚少，需进一步建立动物胆囊切除术后模型以研究SO组织是否发生了改变。为此，本课题拟通过检测兔胆囊切除术后离体SO收缩压和肌电图、测定SO组织蛋白中反映收缩功能的肌球蛋白重链(myosin heavy chain，MHC)的表达及SO平滑肌细胞在透射电镜下的变化这三个方面来探讨胆囊切除术后SO本身是否发生了适应性改变，从而为进一步研究如何预防SOD发生和发展提供实验依据。 目的： 探讨兔胆囊切除术后Oddi括约肌是否发生了适应性改变。 方法： 64只成年新西兰大白兔随机分为4组(A，B，C，D)，A，D组各20只：B，C组各12只。A组为对照组，采取假手术方式以排除手术应激的影响，禁食12 h(可自由饮水)后，速眠新注射液0.2 mL/kg，乙醚间断吸入复合麻醉，剑突下腹正中切口进腹，寻找有胆囊的肝叶后牵出腹腔，找到胆囊后即关腹，术后饲养8wk。B，C，D组为实验组，同法进腹，0＃丝线结扎胆囊管后分离胆囊床并完整切除胆囊，全层间断关腹，术后分别饲养2，4，8 wk。按设计的时相点饲养结束后将兔麻醉并取出SO，每组各取只经离体测压和肌电检测后提取总蛋白后通过Western Blot法检测SO中的MHC表达变化，另各取A，D组中的6只的SO行石蜡切片免疫组化检测MHC表达变化，A，D组剩余的2只的SO行透射电镜检查。 结果： 1.B，C，D组相对于A组离体SO压力波幅逐渐升高(P<0.05)，而基础压及肌电频率、电压均未见明显变化； 2.B，C，D组SO中的MHC表达相对于A组也逐渐升高且有统计学差异(P<0.05)，免疫组化示D组相对于A组平滑肌细胞中的肌球蛋白增多； 3.透射电镜显示：与对照组相比，SO平滑肌细胞内密斑、密体增多。 结论： 1.兔胆囊切除术后离体SO的收缩能力增强； 2.兔胆囊切除术后MHC表达上调； 3.兔胆囊切除术后可致SO平滑肌的细胞骨架发生改变，也反映其收缩能力的增强。 以上结果均提示SO的这些变化可能是胆囊切除术后患者发生SOD的病理基础之一。本实验为进一步探索SOD的发生机制提供了实验基础，并为临床治疗提供了新的思路。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:英文缩写一览表

声明

前 言

第一部分 兔胆囊切除术后SO离体收缩及肌电检测

材料与方法

结 果

讨 论

第二部分 兔胆囊切除术后SO中肌球蛋白重链表达变化

材料与方法

结 果

讨 论

第三部分 兔胆囊切除术后SO平滑肌细胞透射电镜检测

材料与方法

结 果

讨 论

全文结论

致谢

参考文献

文献综述 Oddi括约肌功能障碍综合征的研究现状及诊治

攻读硕士学位期间发表的文章