TGF-β3缓释组织工程滑膜鞘的研制*

摘要

一、研究背景：
　　屈指肌腱损伤后愈合发生粘连常常导致手指的关节活动受限,目前仍是手外科术后常见的并发症,往往需要再次手术治疗。尽管随着材料和手术技术、康复手段的进步,如何减少肌腱损伤愈合后粘连仍然面临挑战。研究发现有滑膜鞘肌腱在抗粘连方面明显优于无滑膜鞘肌腱,滑膜鞘通过分泌滑液给肌腱提供营养,同时通过自身分泌的细胞因子来减少瘢痕形成,但其数量少、取材会对局部组织造成损伤,如果使用人工肌腱也面临着免疫排斥反应等问题。如果我们对无滑膜鞘或滑膜鞘损伤的肌腱给予人工化改造,制备组织工程滑膜鞘,将有可能大大减少肌腱损伤愈合后粘连问题。
　　近年来,转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)家族在瘢痕形成过程中的作用被越来越重视,TGF-β被认为是肌腱损伤后粘连、瘢痕形成的关键因子。研究发现在皮肤损伤愈合过程中,加入转化生长因子TGF-β1,2的中和抗体或增加TGF-β3的量能有效减少瘢痕的形成。TGF-β3在减少瘢痕形成的治疗中被认为是有效和可行的。
　　壳聚糖是几丁质部分脱乙酰基的产物,在自然界中广泛存在,壳聚糖溶液中带有高密度的正电荷,可以与多种水溶性的阴离子物质结合,并可以用来制备壳聚糖微球、纤维和多孔支架。壳聚糖具有良好的生物相容性和生物可降解性,在体内可被溶菌酶等酶解成低聚糖,降解产物能被生物体完全吸收。
　　本研究拟利用壳聚糖微球负载TGF-b3,构建负载缓释TGF-b3微球的壳聚糖组织工程支架,然后种植滑膜细胞,构建TGF-b3缓释组织工程滑膜鞘,并检测其生物相容性。本研究将为肌腱粘连的防治提供新的理论依据和实验基础,将可能为临床手外科屈指肌腱粘连的防治提供有效的方法。
　　二、研究目的：
　　通过制备负载转化生长因子β3(TGF-β3)的缓释组织工程滑膜鞘,探索减少肌腱损伤愈合后粘连的新方法。
　　三、研究内容：
　　1.采用乳化交联法制备负载TGF-β3的壳聚糖缓释微球,扫描电镜观察并检测其体外缓释效果。
　　2.利用冷冻干燥法制备壳聚糖三维支架,将壳聚糖微球引入支架,扫面电镜观察。3.将滑膜细胞收集后种植于含TGF-β3微球的壳聚糖三维支架,MTT法检测微
　　球和支架材料对滑膜细胞增殖的影响,检验材料和细胞的体外相容性。
　　四、结果：
　　1.壳聚糖微球扫描电镜下观察呈球状,平均粒径28.5±4.3μm。
　　2.对微球缓慢释放TGF-b3进行连续监测7天,累积总释放率为46.2％±0.3%。
　　3.壳聚糖三维支架扫面电镜观察孔隙较为一致,孔隙直径平均180.4±35.3μm,孔隙率83.2%±0.6%。微球可均匀扩散并嵌入到支架中。
　　4.滑膜细胞在支架和微球间生长良好。MTT法检测TGF-β3微球和支架不影响滑膜细胞正常生长增殖,材料体外相容性较好(p>0.05)。
　　五、结论：
　　本研究验证了负载TGF-β3的微球体外缓释效果良好,材料和滑膜细胞具有良好的生物相容性,组织工程滑膜鞘为减少肌腱损伤愈合后粘连提供了新方法。

目录

封面

声明

目录

缩略语表

英文摘要

中文摘要

第一章 前言

1.1选题缘由

1.2 研究背景

1.3 研究意义

1.4 研究内容

1.5 研究方法

第二章 负载TGF-β3壳聚糖微球的制备及缓释效果研究

2.1 前言

2.2 材料与方法

2.3 结果

2.4 讨论

2.5 小结

第三章 壳聚糖不对称膜的制备、形态学观察及水结合能力的测定

3.1 前言

3.2 材料与方法

3.3 结果

3.4 讨论

3.5 小结

第四章 TGF-β3缓释组织工程滑膜鞘的制备及观察

4.1 前言

4.2 材料与方法

4.3 结果

4.4 讨论

4.5 小结

全文总结

参考文献

文献综述肌腱损伤修复研究进展

参考文献

攻读学位期间的论文和专利

致谢