Oncomodulin在小鼠脑发育过程中的表达及其性别差异的研究

摘要

研究背景：
　　脑的发育和分化从早期乃至生命周期结束，是一个漫长持久的过程，这个过程受基因、分子和环境等多种因素的影响。脑的结构和功能复杂，表现出一定的性别差异。尽管脑研究已取得了一定的突破，但它还存在无数的奥秘需要人们去探索，为许多脑发育畸形以及神经退行性疾病找到理论依据。目前，脑的发育研究已成为神经科学领域中的一个研究重点。
　　钙结合蛋白(Calcium binding protein，CaBP)是在生物信号中钙离子的重要载体。研究表明其家族中的很多成员在脑内有表达并聚集在神经元内，它在维持神经元的结构和功能、神经递质的释放及神经元的发育等方面发挥着极其重要的作用。癌钙调蛋白(Oncomodulin，Ocm)是钙结合蛋白家族成员之一。目前，研究者对Ocm在神经系统中的表达和作用认识的还比较少，其发现主要在内耳和视神经方面。也有研究者检测了小鼠间脑Ocm的mRNA水平，发现Ocm在小鼠间脑部位有低表达，但Ocm在脑内其它部位是否有表达还不是很清楚，它在脑发育的不同发育时期以及在不同性别脑内的表达是否存在差异还未见相关报道。
　　本项研究我们首先观察了Ocm在成年小鼠脑内的表达和分布情况，然后再进一步探索它在小鼠出生后不同发育时期主要脑区的表达变化，最后我们还在小鼠脑内检测了Ocm表达的性别差异。本项研究为以后进一步深入探索Ocm在脑内的功能奠定形态学基础。
　　研究方法：
　　使用硫酸镍铵增强显色的免疫组织化学方法检测Ocm在成年C57BL/6小鼠脑内的分布以及在性别脑之间表达的差异。运用RT-qPCR方法检测小鼠脑发育不同发育时期(P3d、P7d、P21d、P60d)，Ocm基因的表达模式。
　　研究结果:
　　1.Ocm阳性细胞染色结果为蓝黑色，阳性产物主要位于细胞胞浆，并且主要表达在神经元内。
　　2.Ocm免疫阳性产物在脑内广泛表达，但在各脑区分布不是很均匀，如在大脑皮层、海马、丘脑等均可见强阳性表达，而在黑质和纹状体部位表达很少。
　　3.小鼠出生后不同发育时期(P3、P7、P21、P60)，Ocm在嗅球、大脑皮层、中脑和小脑部位均有表达，并且它在这些不同部位表达的变化趋势是不一致的。
　　4.Ocm免疫阳性产物在雌性小鼠和雄性小鼠脑内表达部位比较相似，但少数核团在表达程度上也存在性别差异。
　　研究结论：
　　1.Ocm在正常C57/BL6小鼠的脑组织中广泛表达，提示Ocm可能参与脑内的一些生理功能。
　　2.在出生后不同发育时期小鼠脑内均能检测到Ocm表达，提示Ocm可能参与了脑的发育过程。
　　3.Ocm阳性产物在雌性小鼠和雄性小鼠的同一核团表现出某些性别差异，提示Ocm可能受激素的影响，在脑内发挥的调节作用是不一样的。
　　总之，本研究利用PCR和免疫组化技术比较全面的研究了Ocm在小鼠脑内的表达模式及其在发育过程中的动态变化，为探索Ocm在脑的功能提供了重要的实验依据。

目录

声明

英文缩写一览表

摘要

第一章 前言

第二章 Oncomodulin在成年小鼠脑内的表达与分布

2．1 材料和方法

2．2 实验结果

2．3 讨论

2．4 小结

第三章 Oncomodulin在生后不同发育时期小鼠脑内表达的差异

3．1 材料和方法

3．2 实验结果

3．3 讨论

3．4 小结

第四章 Oncomodulin在成年小鼠脑内表达的性别差异

4．1 材料和方法

4．2 实验结果

4．3 讨论

4．4 小结

全文总结

参考文献

文献综述 神经系统中Oncomodulin表达分布与功能研究进展

攻读硕士学位期间发表和撰写的文章

攻读硕士学位期间参加的课题

致谢