蒺藜TTS-12抗真菌活性研究及其凝胶剂的制剂研究

摘要

目的：测定蒺藜中TTS-12对四种常见致病性皮肤癣菌的体外抗真菌作用，制备蒺藜TTS-12凝胶剂及评价蒺藜TTS-12凝胶对豚鼠感染须癣毛癣菌体癣模型的影响，为蒺藜TTS-12凝胶申请医院制剂提供依据。
　　方法：
　　1.运用微量液基稀释法测定蒺藜TTS-12对四种常见致病性皮肤癣菌的MIC值及MFC值，评价蒺藜TTS-12的体外抗真菌活性。
　　2.通过HPLC-ELSD法测定蒺藜TTS-12在不同溶剂中的溶解度，表观油水分配系数及蒺藜TTS-12原料药的稳定性，为蒺藜TTS-12的处方设计提供依据。
　　3.通过正交试验设计处方并以外观及稳定性为评价标准，筛选出外观稳定性合格的凝胶剂并通过体外释放度进一步筛选出体外释放效果较优的凝胶剂。
　　4.构建豚鼠感染须癣毛癣菌体癣模型，通过对蒺藜TTS-12凝胶给药后的豚鼠进行背部病变程度评分、病灶皮肤真菌培养和观察病灶皮肤病理变化，探讨蒺藜TTS-12凝胶对豚鼠感染须癣毛癣菌体癣模型的影响。
　　结果：
　　1.蒺藜TTS-12对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌、石膏样小孢子菌标准菌株的MIC80值(μg/mL)分别为1、1、0.5、2；MFC值(μg/mL)分别为16、32、8、32；临床分离菌株(共17株)MIC80值(μg/mL)分别为1、1.1487、1.5874、2；MFC值(μg/mL)分别为10.7672、13.9288、12.6992、22.6274。
　　2.建立的蒺藜TTS-12原料药HPLC-ELSD含量测定分析方法，简便、准确可靠。蒺藜TTS-12原料药在高温高湿条件下含量变化＜5％，性质稳定；在不同溶剂中的溶解度随着溶剂比例增大而增大，80%丙二醇溶解度为1.9975mg/mL，3%吐温80溶解度为0.8788mg/mL，70%乙醇溶解度为4.6952mg/mL；蒺藜TTS-12的表观油水分配系数为3.7，可知蒺藜TTS-12微溶于水，较易溶于脂。
　　3.通过正交试验设计的9组凝胶中，1、2、3、4、6号处方外观及稳定性合格，综合评分均＞3，在体外释放度试验中，5组凝胶的体外释放度大小为3＞6＞4＞1＞2，进一步筛选出释放效果较好代表低、中、高剂量的3组处方用于对豚鼠感染须癣毛癣菌体癣模型的给药。
　　4.在豚鼠感染须癣毛癣菌体癣模型中，除空白组外，与模型组相比，给药组的背部病变程度评分都有不同程度的下降。在第4d，与模型组相比，低剂量组评分降低有统计学差异（P＜0.05），中、高剂量的蒺藜TTS-12凝胶组评分均有明显地降低（P＜0.01），在第8d，与模型组相比，低、中、高剂量的蒺藜TTS-12凝胶组和阳性对照组评分均有明显地降低（P＜0.01）。各组病灶皮肤真菌培养阴性率分别为：空白组100%、模型组20.83%、阴性对照组25%、阳性对照组75%、低剂量组41.67%、中剂量组51.17%、高剂量组66.67%。病灶皮肤HE染色切片结果显示低、中、高剂量组有一定程度的棘层肥厚，炎性细胞浸润较模型组轻，其中高剂量组的角质层正常，炎症情况比较轻。
　　结论：
　　1.微量液基稀释法测定的结果表明，蒺藜TTS-12对红色毛癣菌，须癣毛癣菌、犬小孢子菌、石膏样小孢子的标准菌株及临床分离菌株均具有较好的体外抗真菌活性。
　　2.蒺藜TTS-12原料药在高温高湿条件下含量变化小，便于凝胶的制备及存放。通过处方筛选出的凝胶颜色、涂布性等性状均符合要求，体外释放度试验筛选的凝胶具有良好的释放性能。
　　3.蒺藜TTS-12凝胶对豚鼠感染须癣毛癣菌体癣模型的病变情况有不同程度的影响，在低、中、高剂量的蒺藜 TTS-12凝胶的作用下，体癣模型豚鼠背部病变均有较好的改善作用。在病灶皮肤真菌培养中，低、中、高剂量组的阴性率与模型组相比，均有提高，但均低于阳性对照组，说明蒺藜TTS-12凝胶具有一定的杀菌作用。

目录

声明

第一章 绪论

1.1浅部真菌病及其用药概况

1.2中药防治浅部真菌病研究

1.3蒺藜抗菌研究

1.4抗真菌活性评价方法研究

1.5局部凝胶剂的研究

1.6课题研究意义及研究内容

第二章 蒺藜TTS-12体外抗真菌活性研究

2.1前言

2.2试验材料

2.3试验方法

2.4结果

2.5讨论

第三章 蒺藜TTS-12凝胶剂处方前研究

3.1前言

3.2试验材料

3.3试验方法

3.4结果

3.5讨论

第四章 蒺藜TTS-12凝胶剂制剂研究

4.1前言

4.2试验材料

4.3试验方法

4.4结果

4.5讨论

第五章 蒺藜TTS‐12凝胶剂对豚鼠感染须癣毛癣菌体癣模型的作用研究

5.1前言

5.2试验方法

5.3统计方法及数据处理

5.4结果

参考文献

攻读学位期间发表的论文

英文缩略表

致谢