土萆薢的化学成分及其两种近缘种药材的比较鉴别研究

摘要

土萆薢来源于百合科肖菝葜属肖菝葜（Heterosmilax japonica Kunth.）的干燥根茎，为两广地区习用药材，俗称土太、川太。土萆薢具有清热解毒、泄浊祛湿以及通利关节等功效，主治湿毒蕴结、梅毒淋浊、筋骨挛痛，是两广地区使用的去湿茶中的主要原料。土萆薢的近缘种药材包括土茯苓和菝葜，土茯苓来源于百合科菝葜属光叶菝葜(Smilax glabra Roxb.)的干燥根茎，菝葜则来源于百合科菝葜属植物菝葜(Smilax china L.)的干燥根茎。迄今为止，对土茯苓和菝葜已经进行了较深入的研究，而土萆薢作为地方习用药材，研究较少，药用价值需要更多的挖掘，因此土萆薢具有很高的研究价值。同时由于土萆薢、土茯苓和菝葜三者容易混淆，在比较鉴别方面也有现实意义。土萆薢与土茯苓性状相似，在某些地区习称土茯苓，容易引起混淆。亦有人用较易获得的菝葜混充二者。在上述情况下，土萆薢的化学成分研究尤为重要，同时，三者缺少专属性较强的针对有效成分或指标成分的比较鉴别，也很难解决药材采购生产中的实际问题。因此，本课题首先对土萆薢的正丁醇部位进行了化学成分研究，并应用UV法、TLC法、HPLC法和DNA条形码等方法来比较鉴别土萆薢、土茯苓和菝葜三者之间的差异。
　　本研究主要内容包括：⑴土萆薢的正丁醇部位经过分离得到四个化合物，分别是：(R)-4-(2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酰胺基)丁酸甲酯、3S-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸、乙基-β-D-木二糖苷、胡萝卜苷，其中(R)-4-甲基-(2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酰胺基)丁酸甲酯是一个新的化合物，3S-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸和乙基-β-D-木二糖苷是首次从该植物中分离得到。⑵使用UV法测定了三种药材的总黄酮和总皂苷的含量。土茯苓的总黄酮平均含量最高，为54.57 mg/g；菝葜总黄酮平均含量次之，为30.52mg/g；土萆薢总黄酮平均含量最低，仅为3.75mg/g。菝葜的总皂苷平均含量最高，为1.97mg/g；土茯苓总皂苷平均含量次之，为1.00mg/g；土萆薢总皂苷平均含量最低，仅为0.54mg/g。同时建立了三种药材中落新妇苷和白藜芦醇的薄层色谱鉴别方法，土茯苓可检测出落新妇苷，土萆薢和菝葜均不能检测出落新妇苷；土茯苓和菝葜均可检测出白藜芦醇，土萆薢不能检测出白藜芦醇。通过HPLC法测定三种药材中落新妇苷和白藜芦醇的含量，其中土茯苓中落新妇苷和白藜芦醇的平均含量分别为13.28mg/g和0.17mg/g，菝葜中落新妇苷和白藜芦醇的平均含量分别为1.62mg/g和0.64 mg/g，土萆薢未检出落新妇苷和白藜芦醇。根据上述方法，可有效地区分土萆薢、土茯苓和菝葜三种药材。⑶应用DNA分子生物技术，建立了可以有效区分土萆薢、土茯苓和菝葜三种药材的ITS2序列DNA条形码，NJ树显示三种药材可从分子水平上得以区分，开拓了三种药材新的鉴别思路，为解决实际采购、生产和使用中对三者的真伪鉴别提供了方法。

目录

声明

前言

第一章 土萆薢及其两种近缘种药材的研究概述

1.1本草考证

1.2化学成分研究

1.3药理作用研究

1.4生药学研究

第二章 土萆薢正丁醇部位化学成分研究

2.1材料与仪器

2.2 提取与分离

2.3 化合物鉴定

2.4讨论

第三章 土萆薢、土茯苓和菝葜的化学成分鉴别研究

3.1 总黄酮的含量测定

3.2 总皂苷的含量测定

3.3 TLC鉴别和HPLC含量测定

第四章 基于ITS2序列的DNA条形码鉴别研究

4.1 材料、仪器与试剂

4.2 方法

4.3 讨论

第五章 总结和展望

参考文献

附录

附录1：水分测定方法与结果

附录2：图谱

硕士期间参与课题及发表论文

致谢