薰衣草精油的真伪优劣鉴别及其谱-效关系初步研究

摘要

薰衣草是唇形科薰衣草属(Lavandula)薰衣草，不仅可用于观赏，其精油还具有驱虫、抗氧化、抗菌、镇静、催眠等作用，现已被广泛地用于医药、芳香疗法、保健、美容等领域。薰衣草精油品种繁多，品种不同，其主要药理活性就不同，同一品种主要化学成分的差异，也直接影响了其功效。尤其，随着薰衣草精油的应用日益广泛，薰衣草精油的掺假行为也日益严重。鉴于市场中，品种混乱、功效应用不够明确以及掺假等现象，本文针对真实薰衣草精油（Lavandula angustifolia）、穗花薰衣草精油（Lavandula latifolia）、醒目薰衣草精油（Lavandin，Lavendula× intermedia），采用GC-MS、GC对其进行化学成分分析；采用GC及GC指纹图谱等方法，对不同品种薰衣草精油进行真伪优劣鉴别；探究用GC分析方法来解决行业内精油掺假和人工添加等问题。另一方面针对不同品种的薰衣草精油的药理活性进行研究，结合指纹图谱建立薰衣草精油谱-效关系。
　　主要研究内容和结果如下：
　　1、采用GC-MS方法对真实薰衣草精油、穗花薰衣草精油、醒目薰衣草精油化学成分进行了分析，测定出各品种薰衣草精油的组分及质量分数。组分分析表明：真实薰衣草品质较好，其中Linalool、乙酸芳樟酯的含量相对另外2个品种的精油含量要高。采用主成分分析（PCA）和聚类分析（HCA）对三种薰衣草进行分析，结果表明，此方法均能够很好地鉴别出3个品种薰衣草精油。
　　2、对3个品种薰衣草精油分别构建了的GC指纹图谱，进行相似度分析。结果表明，同一品种的薰衣草精油相似度较高，均在0.9以上。对3个品种共32个样品的指纹图谱进行比较和相似度评价，各品种之间相似度相对集中，9批次的真实薰衣草精油的相似度在0.902~0.947，11批次的穗花薰衣草精油相似度在0.625~0.835，11批次的醒目薰衣草精油相似度在0.964~0.995，能很好地鉴别出3种薰衣草精油之间的区别，与主成分分析和聚类分析结果一致。
　　3、采用GC直观对比方法对薰衣草精油中人工添加化合物和基础油进行分析。结果表明，通过直观对比方法，可快速直观对人工添加的化合物芳樟醇和乙酸芳樟酯以及人工添加的橄榄油、葡萄籽油、无色霍霍巴油、小麦胚芽油、椰子油、月见草油和花生油等基础油的鉴别。
　　4、采用微量稀释法对薰衣草精油的体外抑制作用进行了初步探究，结果表明：三种薰衣草精油对部分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有一定的抑制活性，对表皮葡萄球菌的抑制效果相对最好，MIC值为1.563μL/mL～6.250μlL/mL，而醒目薰衣草精油对表皮葡萄球菌MIC3.125～3.937μL/mL，MBC50.000~62.996μL/mL；对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的的抑制作用相当，MIC值为3.125μL/mL～6.250μL/mL，对大肠杆菌的杀灭MBC（6.250～12.500μL/mL）作用最好；对铜绿假单胞杆菌的抑菌效果相对最不理想，MIC值为30.000～37.500μL/mL，MBC均大于100.00μL/mL。三种薰衣草精油对浅部真菌有较好的抑制和杀灭作用。真实薰衣草精油对须癣毛癣菌和红色毛癣菌MIC0.391～1.563μL/mL，MBC为1.563~6.250μL/mL。对犬小孢子菌的MIC为0.780～3.125μL/mL，浓度在3.125～6.250μL/mL有较好的孢子杀灭作用。醒目薰衣草精油对红色毛癣菌的MIC0.391～0.620μL/mL，MFC为1.563～2.480μL/mL，对须癣毛癣菌的MIC0.391～0.781μL/mL，MFC为1.563～3.125μL/mL，醒目薰衣草精油的MIC（0.391～0.781μL/mL）和MFC（1.563～3.125μL/mL）表明对犬小孢子菌有较好的抑制和杀灭作用。结果表明，醒目薰衣草精油对细菌和真菌的抑制和杀灭作用相对优于真实薰衣草精油和穗花薰衣草精油，因此醒目薰衣草精油在抑制和杀灭上述4种细菌和3种真菌方面相对另外2种薰衣草精油是最优选择。
　　5、给小鼠吸入薰衣草精油后，观察薰衣草精油对小鼠自主活动的影响来探究薰衣草精油的镇静作用。结果表明，真实薰衣草精油（Z-1、Z-2、Z-3、Z-4、Z-5、Z-7、Z-8、Z-10、Z-12）与空白组比较，能显著减少小鼠自主活动，P＜0.05，但穗花薰衣草精油和醒目薰衣草精油对小鼠自主活动减少不明显，没有显著性。对真实薰衣草精油进行醋酸扭体法和小鼠热板法观察其镇痛效果，结果表明薰衣草精油组与空白组比较，均不能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数，小鼠吸入乙酸芳樟酯和芳樟醇组，与空白对照比较，P＜0.05，具有显著性。各组药品组与空白组比较，对热板所致小鼠疼痛无明显抑制作用。因此，三种薰衣草精油，镇痛效果均不明显，其中能够较好发挥镇静作用的品种是真实薰衣草精油。
　　6、采用SPSS22统计软件，结合3个薰衣草精油品种分别获取GC指纹图谱和药理作用，对真实薰衣草精油各个特征峰和药效指标进行相关分析和回归分析，建立“谱-效关系”。结果表明：通过偏最小二乘法分析，能够很好地建立真实薰衣草精油的谱-效关系，预测影响药效的主要12个峰为f4、f10（1,8-cineole）、f11（Linalool）、f14（α-松油醇）、f18（薰衣草乙酸酯）、f20号（乙酸芳樟酯）、f21（β-石竹烯）、f22、f23、f25、f26、f27峰对真实薰衣草精油的抑菌作用有很大的影响。

目录

声明

第一章 绪 言

1.1研究现状

1.2研究目的、意义

第二章 薰衣草精油GC-MS化学成分分析

2.1实验材料

2.2实验内容

2.3结果与讨论

2.4本章小结

第三章 薰衣草精油指纹图谱建立及分析

3.1实验器材及材料

3.2实验方法和内容

3.3结果与讨论

3.4 本章小结

第四章 薰衣草精油中人工添加成分的GC鉴别探讨

4.1实验仪器与试药

4.2实验方法和内容

4.3方法学考察

4.4结果与讨论

4.5本章小结

第五章 薰衣草精油体外抑菌作用探究

5.1实验材料和仪器

5.2实验内容

5.3结果与讨论

5.4本章小结

第六章 薰衣草精油镇静、镇痛作用探究

6.1实验仪器和试剂

6.2实验内容

6.3结果与讨论

6.4本章小结

第七章 基于抑菌作用的薰衣草精油谱-效关系探究

7.1数据来源

7.2实验内容

7.3结果与讨论

7.4 本章小结

总结与讨论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文